【摘 要】
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人肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)是一个多效性细胞因子,既能在体内 或体外杀伤哺乳动物肿瘤细胞,也能促进淋巴细胞和内皮细胞的炎性反应,正是后者限制了它作为肿
【出 处】
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中国人民解放军军事医学科学院 解放军军事医学科学院
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人肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)是一个多效性细胞因子,既能在体内 或体外杀伤哺乳动物肿瘤细胞,也能促进淋巴细胞和内皮细胞的炎性反应,正是后者限制了它作为肿瘤药物的应用.同时,TNF有两种受体,二者胞外区有28%的同源性,胞内区无同 源性.为探讨两种受体与两种效应之间的关系,根据模建的TNF与受体胞外区Cys18-Phe147 片段的三维结.以编码TNF成熟肽的基因为模板,利用PCR重叠延伸法构建了前面设计的7个突变体.采用MTT染色的方法检测了四个突变体(E23R、Q27E、E53R和Q67E)对R55受体及主要表达该受体的细胞HEp-2、R75受体及主要表达该受体的细胞U937的结合能力:四个突变体中E53R和Q67E对受体的结合具有选择性,E53R主要结合R75受体,Q67E主要结合R55受体.采用MTT染色的方法检测了四个突变体(E23R、Q27E、E53R和Q67E)对R55受体及主要表达该受体的细胞HEp-2、人白血病细胞U937、人肝癌细胞SMMC-7721和人肺癌细胞A549的体外细胞毒性.总之,获得了两人设计一致、具有受体选择性的突变体,二者的生物活性表现出差异,为研究TNF的受体一效应关系奠定了基础,这将有助于理解TNF的生物作用,对其作用为肿瘤治疗药物的应用研究有一定指导作用.
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