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罗汉果是一种珍贵的药食两用植物资源,具有治疗咽喉痛、祛痰止渴、通便等功效。罗汉果苷V是罗汉果的主要生物活性成分,在体内外均具有较强的消炎和抗氧化能力。而罗汉果苷IIE作为罗汉果苷V在体内的主要代谢产物是否具有相同的生物活性还有待研究。本课题的研究目的是利用蛋白免疫印迹法、酶联免疫吸附试验和荧光检测DCFH-DA探针来研究罗汉果苷IIE对脂多糖（LPS）刺激的RAW264.7细胞炎症及氧化应激的生物学效应。通过本论文的研究和分析得出规律,让人们更加全面客观地认识罗汉果苷IIE促进人体健康的作用机制。可以为其在食品医药领域的进一步开发应用奠定理论基础,帮助人们从蛋白组水平和细胞信号转导来评价罗汉果苷IIE对人体健康的促进作用。本文的研究内容和结果为:1、RAW 264.7小鼠巨噬细胞用高糖培养基培养24 h,用内毒素LPS诱导RAW264.7细胞,使之建立细胞炎症模型。再用不同浓度罗汉果苷IIE处理细胞12 h,回收细胞提取蛋白,利用蛋白免疫印迹法检测其蛋白表达水平。结果发现罗汉果苷IIE剂量依赖地抑制细胞中一氧化氮合酶（iNOS）、环氧化合酶2（COX-2）和前列腺素E2（PGE2）的表达。同时罗汉果苷IIE也可以明显降低JNK、p-38、MEK和IκBα的磷酸化水平。说明罗汉果苷IIE是通过抑制MAPK-NF-κB炎症信号通路,减少了炎症靶标蛋白iNOS和COX-2的表达,并抑制了炎症因子PGE2的产生,从而发挥了其抗炎特性。2、选择处于指数生长期的细胞接种于多孔板中,培养12 h,LPS诱导建立细胞氧化应激模型。使用荧光显微镜和荧光酶标仪检测细胞内活性氧的水平变化,结果发现罗汉果苷IIE通过清除细胞内ROS,展现了其抗氧化的效果。3、RAW 264.7小鼠巨噬细胞用高糖培养基培养24 h,用内毒素LPS诱导RAW 264.7细胞,建立细胞氧化应激模型,蛋白免疫印迹检测Nrf2、HO-1和NQO1结果发现,罗汉果苷IIE很有可能使Nrf2/ARE信号通路活化,激活其下游抗氧化相关蛋白和Ⅱ相解毒酶的表达,发挥其较强的抗氧化生理功能。此外,上游信号通道研究表明,罗汉果苷IIE还诱导PI3K/AKT1信号通路的激活,这些结果说明,罗汉果苷IIE可能通过激活PI3K/AKT1-Nrf2/ARE信号通道来抵抗其氧化应激生理功能并发挥其抗炎效果。以上结果表明,罗汉果苷IIE可以抑制细胞内活性氧的过度产生,通过调控PI3K/AKT1和MAPKs等信号通道来同时激活Nrf2/ARE抗氧化信号通路和抑制NF-κB炎症信号通路来增强抗氧化蛋白和脱毒酶的表达,及减少炎症相关蛋白和细胞因子的产生,从而发挥其消炎抗氧化作用,为研发膳食补充剂和实现其临床应用提供了分子依据和理论基础。