【摘 要】
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目的：本试验旨在通过姜黄素联合5-Fu（5-氟尿嘧啶）分别作用于人结肠癌HCT-8细胞株及HCT-8/5-Fu细胞株，探讨姜黄素对人结肠癌耐药细胞株HCT-8/5-Fu耐药的逆转作用。 方法：通过细
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目的：本试验旨在通过姜黄素联合5-Fu（5-氟尿嘧啶）分别作用于人结肠癌HCT-8细胞株及HCT-8/5-Fu细胞株，探讨姜黄素对人结肠癌耐药细胞株HCT-8/5-Fu耐药的逆转作用。 方法：通过细胞复苏、细胞传代、细胞冻存掌握细胞培养基本操作方法，绘制人结肠癌HCT-8细胞及HCT-8/5-Fu的细胞生长曲线，应用CCK-8法测定姜黄素、5-Fu对HCT-8细胞株及其耐药株的细胞毒性，通过5-Fu与姜黄素药物联合用药计算出对 HCT-8/5-Fu耐药株的耐药倍数及逆转倍数。了解姜黄素与5-Fu联用对于HCT-8敏感株及耐药株的协同作用，用流式细胞仪检测姜黄素与5-Fu对HCT-8敏感株及耐药株细胞周期及细胞凋亡的影响，在透射电镜下观察姜黄素与5-Fu对HCT-8敏感株及耐药株细胞超微结构的影响，促进细胞凋亡，通过实时荧光定量PCR（聚合酶链式反应）实验及Westernblot检测BCL2、Survivn、P-gp、HSP-27等目的基因的表达，采用SPSS20.0统计软件进行分析，定量资料应用单因素方差分析，实验数据以x?s表示，P<0.05有统计学意义。 结果：（1）姜黄素与5-Fu联用对于HCT-8敏感株及耐药株作用，表现在对于HCT-8敏感株及耐药株，姜黄素与5-Fu联用均表现出协同作用。（2）用流式细胞仪检测出不同剂量的姜黄素与5-Fu干预敏感株及耐药株细胞后，G0/G1期细胞数显著增加，S+G2/M期细胞数显著减少，细胞周期阻滞在 G0/G1并促使细胞凋亡，随着药物浓度的增加，细胞株凋亡率逐渐升高，呈明显的浓度依赖性关系。（3）在透射电镜下见发生凋亡的细胞外形不规则，胞质会有大空泡形成，核染色质凝聚，核质逐渐脱落于胞质内或细胞外成为凋亡小体，细胞表面的微绒毛减少或消失，线粒体模糊，符合细胞凋亡表现。（4）各组干预药物的改变，目的基因（BCL2、Survivin、P-gp、HSP-27）的相对表达量逐渐减少，呈剂量依赖性，与对照组相比，差异具有统计学意义(P<0.05)。 结论：姜黄素具有逆转人结肠癌HCT-8/5-Fu细胞株耐药性的作用，可能与下调相关基因蛋白BCL2、Survivin、P-gp、HSP-27的表达有关。
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