川芎嗪对大鼠胶原性关节炎血管生成与巨噬细胞分泌VEGF的影响

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目的:通过观察川芎嗪对大鼠胶原性关节炎滑膜炎症发展,血管生成和血管内皮生长因子表达的影响,以及川芎嗪对大鼠腹腔巨噬细胞受脂多糖刺激后分泌血管内皮生长因子和表达缺氧诱导因子-1 的影响,探讨川芎嗪抗血管生成的机制。 方法: 1. 皮内注射Ⅱ型胶原诱导大鼠胶原性关节炎,给予 100mg/kg?d、50 mg/kg?d 川芎嗪灌胃,连续用药 30 天。以 10mg/kg?d 环孢霉素 A灌胃为阳性对照。检测关节炎指数积分和炎症足垫厚度,X 摄片检测关节结构,透射电镜观察滑膜毛细血管内皮细胞超微结构,免疫组化观察滑膜血管内皮生长因子的表达和滑膜微血管密度,RT-PCR 方法检测血管内皮生长因子 mRNA 的表达,Western Blot 方法检测血管内皮生长因子蛋白的表达。 2. 原代培养大鼠腹腔巨噬细胞,给予 10μg/ml 脂多糖刺激同时,分别加入剂量为 100μg/ml、10μg/ml、1μg/ml 的川芎嗪共同培养,以加入 0.5μg/ml 地塞米松为阳性对照。ELISA 方法检测巨噬细胞培养上清液中血管内皮生长因子的含量,MTT 法检测药物对巨噬细胞增殖的影响,Western Blot 方法检测巨噬细胞中缺氧诱导因子-1α蛋白的表达。 结果: 1. 用药 30 天后,100mg/kg?d 川芎嗪组大鼠关节炎指数为 6.57±1.06,与模型组 7.42±1.59 相比显著降低(P<0.05);50 mg/kg?d
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