固定化酶的制备及其在海参饲料中的应用研究

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本课题致力于采用酶工程技术改善海参养殖饵料消化吸收的研究。目前,消化酶已被广泛应用于动物饲料中,它不仅能够起到促进养分消化和吸收,提高动物的生长速率、饲料转化率和增进动物健康,而且能减少养殖业中氮、磷的排放,保护养殖生态环境。因此,饲用酶制剂的应用在现代化水产养殖业中,起着增加经济效益与保护生态环境的双重作用,越来越受到人们的关注。本文以海参肠道内主要消化酶—α-淀粉酶和酸性胃蛋白酶作为研究对象,针对海参生长环境特点,把所选择的酶制剂包埋固定化后,再用于改善海参养殖饵料消化吸收。并对该酶的酶学性质、固定化条件优化、以及固定化酶学相关性质及其在海参饲料应用方面做了实验研究。其主要研究内容及结论如下(1)游离酶学性质研究。包括最适反应温度、最适反应pH。结果表明:所选择的α-淀粉酶液最适反应温度60℃、最适反应pH≈5.3;酸性胃蛋白酶最适反应温度58℃、最适反应pH≈2.6。(2)固定化制备条件优化研究。分别对影响固定化效果的四个条件(海藻酸钠浓度、氯化钙浓度、加酶量、固定化时间)做单因素实验,然后通过正交试验确定最适制备工艺。结果表明:固定化α-淀粉酶的最佳制备工艺条件为海藻酸钠浓度2.5%、氯化钙浓度2%、加酶量15%、固定化时间1h;固定化酸性胃蛋白酶的最佳制备工艺条件为海藻酸钠浓度2.5%、氯化钙浓度2.5%、加酶量150%、固定化时间1h。(3)以固定化α-淀粉酶为研究对象,对固定化酶的相关性质进行实验研究。结果表明:最适反应温度58℃、最适反应pH≈5.4。固定化酶连续操作稳定性较好、凝胶直径在2.0mm~2.5mm之间机械强度为宜、4℃低温保存效果较好。(4)应用固定化酶对海参饵料水解效果的研究实验。包括水解时间、酶解温度、固定化酶添加量等对饵料酶解率的影响。结果表明:α-淀粉酶在水解时间25min~30min,固定化酶添加量为40mg/ml,水解温度为30℃时酶解率均可达到25%以上;在饵料浓度为5%条件下,酸性胃蛋白酶在水解时间25min~30min,水解温度为30℃,添加量20mg/ml时酶解率均可达到20%以上,连续操作性较好。
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