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目的:建立测定细胞色素P4502D6酶(cytochrome P4502D6,CYP2D6,又称异喹胍羟化酶)缺陷基因——CYP2D6*10、谷胱甘肽转移酶(glutathione S-transferases,GSTs)基因——GSTT1和GSTM1多态性的分子生物学方法;测定并分析CYP2D6*10、GSTT1和GSTM1在中国终末期肾衰(end stage renal disease,ESRD)患者中的遗传变异,试探讨以上三种基因遗传变异与ESRD的关系;初步探讨ESRD患者GSTs和CYP2D6酶缺陷与其全段甲状旁腺激素(intact parathyroid hormone,iPTH)水平异常是否具有相关性.该研究从遗传药理学的角度出发,为研究ESRD发病机理及其治疗提供新的思路和理论依据.方法:对广泛使用的GSTT1、GSTM1 PCR检测法进行了改进:将常规2μl或5μl反应体系缩减到15μl;建立了一种在单管中快速进行CYP2D6*10等位基因检测的新方法:3端倒数第三位分别引入了一个人工错配碱基的两条内引物,分别与野生型和突变型的位点配对,与一对外引物配合可扩增出不同长度的特异性片段,并以此来确定等位基因的类型.收集符合标准的病例组(ESRD组)标本106例,健康对照组167例.用以上建立的分子生物学方法测定病例组和健康对照组每份标本的GSTT1、GSTM1和CYP2D6*10类型,分析三种基因在两组间的分布差异以及GSTT1和GSTM1缺陷基因的联合分布差异,比较不同基因分型组间Scr,BUN,血Ca,血P及iPTH等参数的平均值.采用双抗体夹心免疫放射测定法(immuno-radiometric assay,IRMA)测定ESRD组和健康对照组iPTH值,依次将ESRD组iPTH从小到大分为五个不同水平,分析携带GSTT1、GSTM1和CYP2D6*10缺陷基因的个体在每一水平的分布情况,分析每一级的平均Scr值水平及其与iPTH异常的相关性.