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本研究分为三个部分：一、单碱基延伸法检测乙肝病毒点突变的建立与优化；二、拉米夫定耐药患者血清中HBV YMDD基序变异及与HBV DNA水平的关系；三、乙型肝炎患者HBV DNA前C区突变株的检测及其临床意义。 一、单碱基延伸法检测乙肝病毒点突变的建立与优化 目的 建立一种简便、快速并能检测混合株组成的乙肝病毒点突变(P基因区YMDD基序变异及前C区1896位变异)的检测方法。方法 套式PCR扩增HBV含有待检测位点的基因片段；PCR产物被捕获至链亲合素包被的微孔板；以检测探针与PCR产物杂交，该检测探针3’末端位于待检测变异点上游一位碱基；在四个独立的微孔中分别加入四种荧光素标记的双脱氧核苷酸(Fluorescien-12-ddNTP)及Klenow酶进行单碱基延伸反应；酶标抗荧光素抗体结合Fluorescien-12-ddNTP，加底物显色，测定各孔吸光度，检测变异。每个步骤均设定数个反应条件进行优化。制备HBV前C区1896位野生株和变异株PCR产物标准品，以不同比例混合，验证本方法检测混合株的准确性和灵敏度。结果本方法总共6个步骤，可在5个小时左右完成检测。用本方法检测了57份血清标本的HBV DNA的YMDD基序变异，与测序结果完全相符；以混合的野生株血清和变异株PCR产物作为标准品，确定了本方法可检出混合株中含量少至10％的毒株。结论单碱基延伸法是一种简便、快速、灵敏度和特异性较高的点突变检测方法，且可以检测混合株中各成份构成比率。 二、拉米夫定耐药患者血清中HBV YMDD基序变异及与HBV DNA水平的关系 目的 研究拉米夫定耐药患者血清中HBV DNAYMDD基序第741位及第743位核苷酸变异情况，并探讨出现拉米夫定耐药时，YMDD变异株检出率与HBV