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本文利用植物组织培养技术,诱导培养甘草愈伤细胞、毛状根,并对其主要药用次生代谢产物-甘草酸、异甘草素、总黄酮的含量与甘草原植物根进行比较。同时,以甘草愈伤细胞、甘草毛状根为材料,对其甘草酸、异甘草素、总黄酮在次生代谢中的动态变化进行了研究。最后本文就细胞分裂素(BAP)对甘草毛状根次生代谢产物含量影响方面做了初步的研究和探讨。
实验结果表明,甘草愈伤细胞、甘草毛状根中异甘草素含量均高于甘草根;甘草愈伤细胞中甘草酸含量与甘草根差异不显著,甘草毛状根中甘草酸含量略低;甘草愈伤细胞与甘草毛状根中总黄酮含量均低于甘草根。
在甘草毛状根次生代谢产物的动态研究中,我们发现,总黄酮含量随培养时间的增加而增加;甘草酸与异甘草素含量则在培养前期迅速上升,分别在第8天和第12天达到最大,此后随培养时间的增加而含量下降。在甘草愈伤细胞次生代谢产物的动态研究中,总黄酮含量亦随培养时间的增加而增加;甘草酸与异甘草素则在第12天和16天达到最大,此后随培养时间的增加而下降。
在BAP对甘草毛状根次生代谢产物调控中,BAP能显著促进甘草毛状根中总黄酮、异甘草素的合成。0.5 mg/L、1 mg/L、5 mg/L的BAP处理,使甘草毛状根中总黄酮含量比对照分别增加了83.9%、359.2%、289.9%,异甘草素含量比对照增加了411.2%、506.1%、419.6%。对甘草毛状根黄酮合成途径中苯丙氨酸解氨酶(PAL)活力进行测定,发现不同浓度的BAP均显著促进了甘草毛状根中PAL
酶活力。说明了BAP可能是通过调节PAL等黄酮合成关键酶的活性,从而提高甘草毛状根中总黄酮、异甘草素含量。