【摘 要】
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国际癌症研究组织报道，许多癌症如子宫颈癌，生殖器相关癌症，口腔癌，喉癌等都与人乳头瘤病毒(Human papilloma virus，HPV)的感染有很大关系。宫颈癌是全球第二大常见的妇科恶性肿瘤
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国际癌症研究组织报道，许多癌症如子宫颈癌，生殖器相关癌症，口腔癌，喉癌等都与人乳头瘤病毒(Human papilloma virus，HPV)的感染有很大关系。宫颈癌是全球第二大常见的妇科恶性肿瘤。大量的形态学和流行病学研究表明，持续的高危型HPV尤其是HPV16和HPV18病毒的感染是引起宫颈上皮内瘤样病变（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）Ⅱ期和Ⅲ期的主要原因。早期蛋白E6和E7是高危型HPV感染的主要致癌蛋白。E6和E7分别通过结合并促进细胞内肿瘤抑制因子p53和Rb的降解导致细胞周期调节失控。它们只在HPV感染细胞中表达，因此可作为宫颈癌治疗性疫苗的靶抗原。 树突状细胞是免疫系统中最有效的抗原提呈细胞，它们可以诱导并调节T淋巴细胞免疫。基因修饰的树突状细胞可表达共刺激分子并激活抗原特异性的细胞毒性T淋巴细胞效应。抗原致敏的树突状细胞疫苗在HPV相关的肿瘤生长保护和免疫治疗中已有一定的研究。 本研究中，我们应用表达HPV16 E6E7抗原蛋白的重组腺病毒感染树突状细胞，在体外水平通过流式细胞术和CCK8法验证了树突状细胞疫苗诱导激活细胞毒性T淋巴细胞(CTL)并对TC-1肿瘤细胞进行杀伤的效果。同时在体内水平通过ELISPOT实验和生长抑制实验分别检测了DC疫苗诱导的细胞免疫水平和抗肿瘤效果。结果表明DC疫苗与脾细胞体外共培养后能诱导强烈的肿瘤抗原特异性CTL反应，并有效杀伤TC-1细胞。此外，小鼠模型表明DC疫苗体内诱导了针对TC-1肿瘤细胞的免疫保护作用。显示了HPV E6E7抗原致敏的DC疫苗在宫颈癌治疗中有巨大的应用价值。同时我们成功构建了表达HPV18 E6E7优化突变融合蛋白的重组腺病毒，为制备重组腺病毒疫苗和腺病毒感染的树突状细胞疫苗奠定了良好的基础。
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