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目的：
探究隔药灸脐法对IBS-D患者miRNA的调控作用，阐释该疗法在miRNA层次上的部分靶位点群，为隔药灸脐法治疗IBS-D提供基因表达调控方面的证据，从RNA层次揭示中医针灸治疗疾病的部分现代科学内涵。
方法：
1.以纳入的20例IBS-D患者为隔药灸脐组，以年龄、性别相匹配的10例健康志愿者为正常对照组，检测隔药灸脐组治疗前和正常对照组外周血中miRNA的差异表达谱。
2.给予纳入的IBS-D患者隔药灸脐法治疗，每周1次，每次2小时，4次为1疗程，连续治疗2个疗程，共计8次。通过IBS-SSS量表评价隔药灸脐组疗效，检测隔药灸脐组治疗后与治疗前外周血中miRNA的差异表达谱。
3.利用miRWalk3.0数据库和miRDB6.0数据库对表达差异的miRNAs进行靶基因预测，取两个数据库的交集，之后对靶基因进行GO富集分析和KEGG通路分析，以得到生物功能聚类注释信息。
4.利用RT-PCR法检测表达差异的miRNAs在20例IBS-D患者、10例健康对照者血清中的表达量，以验证芯片筛选结果，探究隔药灸脐法对IBS-D患者miRNA表达的调控作用。
结果：
1.芯片检测结果显示，与正常对照组相比，IBS-D患者治疗前外周血中有5个miRNAs表达差异显著，其中hsa-let-7b-5p、hsa-miR-19b-3p、hsa-miR-20a-5p、hsa-miR-1246表达下调，miRNABrightCorner30表达上调；与治疗前相比，IBS-D患者治疗后外周血中有5个miRNAs表达差异显著，分别为hsa-let-7b-5p、hsa-miR-19b-3p、hsa-miR-20a-5p、hsa-miR-16-5p、hsa-miR-630，且均为表达上调。
2.患者通过隔药灸脐法治疗后，临床症状得到明显改善，IBS-SSS评分由治疗前236.85±49.24分降为95.90±37.05分，前后对比分析有统计学意义（P<0.01），有效率为90.00%。
3.生物信息学分析结果显示，隔药灸脐组治疗前/正常对照组的靶基因为387个，隔药灸脐组治疗后/治疗前的靶基因为487个，之后对预测出的靶基因进行GO富集分析及KEGG通路分析，发现这些靶基因功能主要与细胞粘附、神经系统发育、RNA转录后基因沉默、miRNA介导的翻译抑制、钙离子结合、GTP酶的固定、电压门控钠通道活性、催乳素信号通路、神经营养因子生成信号通路等相关。
4.RT-PCR结果显示隔药灸脐法治疗后相比治疗前可上调hsa-let-7b-5p、hsa-miR-19b-3p、hsa-miR-20a-5p的表达（P＜0.05）。
结论：
1.IBS-D患者治疗前和正常对照组相比外周血中miRNA表达差异显著，为miRNA可能作为IBS-D诊断和治疗靶点提供了数据支持。
2.隔药灸脐法治疗IBS-D疗效显著。
3.隔药灸脐法可能通过上调hsa-let-7b-5p、hsa-miR-19b-3p、hsa-miR-20a-5p的表达而达到治疗效果，为隔药灸脐法治疗IBS-D提供了基因表达调控方面的证据。
探究隔药灸脐法对IBS-D患者miRNA的调控作用，阐释该疗法在miRNA层次上的部分靶位点群，为隔药灸脐法治疗IBS-D提供基因表达调控方面的证据，从RNA层次揭示中医针灸治疗疾病的部分现代科学内涵。
方法：
1.以纳入的20例IBS-D患者为隔药灸脐组，以年龄、性别相匹配的10例健康志愿者为正常对照组，检测隔药灸脐组治疗前和正常对照组外周血中miRNA的差异表达谱。
2.给予纳入的IBS-D患者隔药灸脐法治疗，每周1次，每次2小时，4次为1疗程，连续治疗2个疗程，共计8次。通过IBS-SSS量表评价隔药灸脐组疗效，检测隔药灸脐组治疗后与治疗前外周血中miRNA的差异表达谱。
3.利用miRWalk3.0数据库和miRDB6.0数据库对表达差异的miRNAs进行靶基因预测，取两个数据库的交集，之后对靶基因进行GO富集分析和KEGG通路分析，以得到生物功能聚类注释信息。
4.利用RT-PCR法检测表达差异的miRNAs在20例IBS-D患者、10例健康对照者血清中的表达量，以验证芯片筛选结果，探究隔药灸脐法对IBS-D患者miRNA表达的调控作用。
结果：
1.芯片检测结果显示，与正常对照组相比，IBS-D患者治疗前外周血中有5个miRNAs表达差异显著，其中hsa-let-7b-5p、hsa-miR-19b-3p、hsa-miR-20a-5p、hsa-miR-1246表达下调，miRNABrightCorner30表达上调；与治疗前相比，IBS-D患者治疗后外周血中有5个miRNAs表达差异显著，分别为hsa-let-7b-5p、hsa-miR-19b-3p、hsa-miR-20a-5p、hsa-miR-16-5p、hsa-miR-630，且均为表达上调。
2.患者通过隔药灸脐法治疗后，临床症状得到明显改善，IBS-SSS评分由治疗前236.85±49.24分降为95.90±37.05分，前后对比分析有统计学意义（P<0.01），有效率为90.00%。
3.生物信息学分析结果显示，隔药灸脐组治疗前/正常对照组的靶基因为387个，隔药灸脐组治疗后/治疗前的靶基因为487个，之后对预测出的靶基因进行GO富集分析及KEGG通路分析，发现这些靶基因功能主要与细胞粘附、神经系统发育、RNA转录后基因沉默、miRNA介导的翻译抑制、钙离子结合、GTP酶的固定、电压门控钠通道活性、催乳素信号通路、神经营养因子生成信号通路等相关。
4.RT-PCR结果显示隔药灸脐法治疗后相比治疗前可上调hsa-let-7b-5p、hsa-miR-19b-3p、hsa-miR-20a-5p的表达（P＜0.05）。
结论：
1.IBS-D患者治疗前和正常对照组相比外周血中miRNA表达差异显著，为miRNA可能作为IBS-D诊断和治疗靶点提供了数据支持。
2.隔药灸脐法治疗IBS-D疗效显著。
3.隔药灸脐法可能通过上调hsa-let-7b-5p、hsa-miR-19b-3p、hsa-miR-20a-5p的表达而达到治疗效果，为隔药灸脐法治疗IBS-D提供了基因表达调控方面的证据。