论文部分内容阅读
目的:
研究他汀类药物对致敏的EAE模型脾单个核细胞增殖的影响,以及与人重组干扰素β1a(INFβ-1a)的协同作用;研究他汀类药物对致敏的MS患者外周血单个核细胞增殖的影响,以及与人重组干扰素β1a的协同作用。通过这两方面的研究,初步探讨他汀类药物治疗EAE及MS的免疫调节机制。
方法:
①以MOGIGd融合蛋白为抗原分别致敏C57BL/6小鼠、Lewis大鼠,免疫后第10天处死,取其脾脏制成单个核细胞悬液,调整细胞密度为2×106/ml,加入96孔板中每孔100ul,分别予ConA、LPS及MOG刺激,同时给予不同浓度辛伐他汀、INFβ-1a进行干预,培养48h后,加入3H-TdR0.5uci/孔,继续培养16h,然后用细胞收集器收集,β液闪仪计数,结果以每分钟脉冲数(CPM)表示,研究辛伐他汀对经ConA、LPS及MOG刺激的脾单个核细胞增殖的影响,及其与INFβ-1a的协同作用。②根据McDonald(2005年)诊断标准,收集2007年6月~2009年1月在温州医学院附属第一医院神经免疫专病门诊或住院确诊为MS的患者15例,要求在近期均未行特殊免疫治疗,并设正常对照组(NC)12例。用人淋巴细胞分离液分离MS患者外周血单个核细胞(PBMC),调整细胞密度为2×106/ml,加入96孔板中每孔100ul,分别予ConA、LPS及MoG刺激,同时给予不同浓度辛伐他汀、INFβ-1a进行干预,培养48h后,加入3H-TdR0.5uci/孔,继续培养16h,然后用细胞收集器收集,β液闪仪计数,结果以每分钟脉冲数(CPM)表示,研究辛伐他汀对经ConA、LPS及MoG刺激的MS患者外周血单个核细胞增殖的影响,及其与INFβ-1a的协同作用。
结果:
①辛伐他汀在1~100uM浓度范围内以剂量依赖的方式抑制了经ConA、LPS及MoG致敏的EAE小鼠、大鼠脾单个核细胞的增殖,对未受刺激物致敏的脾单个核细胞无影响。与阴性对照组相比,单用低剂量的辛伐他汀、INFβ-1a其抑制增殖作用差异均无统计学意义(P>0.05);低剂量的两药联用则对经ConA、MOG致敏的EAE小鼠、经ConA致敏的EAE大鼠脾单个核细胞抑制增殖作用增强,差异有统计学意义(P<0.05);对经LPS致敏的EAE小鼠、经LPS、MOG致敏的EAE大鼠脾单个核细胞其抑制增殖作用虽有所增强,但与阴性对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。②辛伐他汀在1~100uM浓度范围内以剂量依赖的方式抑制了经ConA、LPS、MOG致敏的MS患者外周血单个核细胞的增殖,对未致敏的外周血单个核细胞无影响。低剂量的辛伐他汀与不同剂量INFβ-1a联用可协同抑制致敏MS患者外周血单个核细胞的增殖。
结论:
他汀类药物是有效的免疫调节剂,不仅调节异常的细胞免疫,也调节异常的体液免疫。同时,他汀类药物可协同INFβ-1a抑制致敏的单个核细胞增殖。