抗原决定簇的计算机预测及在DNA疫苗中的应用

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本文利用HLA-Ⅱ抗原决定簇计算机分析软件TEPITOPE对SARS 病毒的S 蛋白作了分析,选定了三段富含抗原决定簇(epitope)的区域,命名为S ept (S epitope)1、S ept2、S ept3,以含有全长SARS S基因的重组质粒T-S为模板,经PCR扩增出这三个基因片段,分别以这些片段作为外源基因构建了DNA重组质粒疫苗,另外,本文将这三个片段相连接,组成多抗原决定簇融合形式,以此构建了多抗原决定簇融合的DNA疫苗,同时,分别以SARS病毒的M,N基因作为外源基因构建DNA疫苗。将这些DNA疫苗免疫小鼠后,检测其血清中抗体的表达,探究基于不同SARS基因及不同抗原决定簇多肽片段的DNA疫苗的免疫效果 此外,用该软件对乙肝病毒表面抗原蛋白HBsAg的抗原决定簇进行预测。选取筛选出了多个可能的抗原决定簇,根据这些序列合成相应的多肽,作为候选抗原决定簇。结果显示这些候选抗原决定簇多肽能够有效地刺激淋巴细胞分泌细胞因子,提示其含有能被淋巴细胞有效识别的HBsAg的抗原决定簇。
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