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目的:观察大鼠切口痛模型上右美托咪定对瑞芬太尼诱发的痛觉过敏的影响及L4-5脊髓背角磷酸化的NR2B表达的变化。
方法:84只雄性SD大鼠,随机分成7组:对照组(C组),切口痛组(I组),切口痛+瑞芬太尼组(R组),切口痛+右美托咪定50μg/kg组(ID组),切口痛+瑞芬太尼十右美托咪定12.5μg/kg组(RD1组),切口痛+瑞芬太尼十右美托咪定25μg/kg组(RD2组),切口痛+瑞芬太尼十右美托咪定50μg/kg组(RD3组),各组n=12。ID、RD1、RD2、RD3组均于七氟醚吸入麻醉前10 min腹部皮下注射用生理盐水稀释至0.15 ml的右美托咪定,而C、I、R组给予生理盐水0.15 ml。除C组外,余各组均制作切口痛模型。切口痛模型制作方法:用11号刀片在SD大鼠右后爪的趾肌位置切开皮肤和筋膜后,纵行切开一个1cm长的切口,从离脚后跟0.5 cm处开始一直延伸到脚趾,皮肤行2侧褥式缝合。各组均测定并计算出术前24 h(T),术后6 h(T1),24 h(T2),48 h(T3)大鼠右后爪的热缩足反射潜伏期(PWTL)及机械缩足反射阈值(PMWT),并于术后48 h行为学检测后七氟醚深麻醉下取L4-5脊髓,用Western blot法检测L4-5脊髓背角磷酸化NMDA受体亚基NR2B的表达。
结果:(1)痛行为学结果:在T1、T2、T3时点,与C组(14.86±0.34g,14.65±0.55 g,14.79±0.51 g;24.76±0.37 s,24.97±0.08 s,24.96±0.11 s)相比,I组(7.70±0.67 g,10.79±1.83 g,10.97±1.87 g;20.74±2.72 s,16.56±1.38 s,22.55±2.01 s)的PMWT值和PWTL值均明显降低(P＜0.05);与I组相比,R组(3.72±0.71 g,6.54±1.27 g,7.27+1.53 g;11.81±2.52 s,11.27±2.30 s,12.30±2.21 s)的PMWT值和PWTL值均明显降低(P＜0.05);与I组相比,ID组(11.57±2.48 g)T1时点的PMWT增加(P＜0.05)。与R组相比,RD1组(13.76±1.59 g、13.10±2.90 g、12.40±3.04 g)可以缓解T1、T2、T3时点瑞芬太尼诱发的切口周围组织的PMWT值的降低(P＜0.05);与R组相比,RDl组(14.62±2.42 s、14.05±2.20 s、14.06±1.79 s)不能缓解T1、T2、T3时点瑞芬太尼诱发的切口周围组织的PWTL值的降低(P＞0.05);RD2组、RD3组可以缓解T1(13.75±1.72 g,14.03±1.01 g)、T2(13.14±2.21 g,14.27±1.33g)、T3(12.78±2.75 g,14.26±1.58 g)时点瑞芬太尼诱发的大鼠切口周围组织的PMWT值的降低(P＜0.05)及T1(16.11±3.06 s,23.56±1.53 s)、T2(15.64±2.97 s,16.54±3.24 s)时点瑞芬太尼诱发的大鼠切口周围组织的PWTL值的降低(P＜0.05)。(2)Western blot的结果:与C组(0.06±0.01)相比,I组(0.38±0.03)可以引起术后48 h时L4-5脊髓背角磷酸化NR2B表达的增加(P＜0.05);与I组相比,R组(0.77±0.11)可以引起术后48 h时L4-5脊髓背角磷酸化NR2B表达的增加(P＜0.05):与I组相比,ID组(0.27±0.02)可以部分抑制由切口痛引起的脊髓背角磷酸化NR2B表达的增加(P＜0.05);RD1组(0.25±0.02)、RD2组(0.13±0.04)、RD3组(0.06±0.02)均可抑制由瑞芬太尼引起的脊髓背角磷酸化NR2B表达的增加。
结论:在大鼠切口痛模型上,(1)瑞芬太尼可以诱发切口周围组织的痛觉过敏;(2)右美托咪定可以预防瑞芬太尼诱发的痛觉过敏,且呈剂量依赖及时间依赖;(3)瑞芬太尼可以引起L4-5脊髓背角磷酸化NR2B表达的增加,右美托咪定以剂量依赖的方式抑制瑞芬太尼引起的脊髓背角磷酸化NR2B表达的增加。