论文部分内容阅读
研究目的：类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)是一种多关节慢性炎症为主要表现的自身免疫性疾病,有关节外组织器官受累,可致残。传统的治疗RA的方法,主要是采用非甾体类抗炎药物、糖皮质激素以及能够改善病情的抗风湿类药物。RA患者的关节滑膜液和血液中有多种细胞因子存在,而致炎细胞因子在RA滑膜成纤维细胞侵袭性生长方面充当了至关重要的角色。近年来研究发现神经系统主要通过迷走神经反射参与炎症调控,在限制炎症应答的过程中发挥着重要的角色,被称作“胆碱能抗炎通路”。迷走神经的主要神经递质乙酰胆碱,是胆碱能抗炎通路的关键性介质。神经递质主要与尼古丁乙酰胆碱受体(nAChR)家族作用,尤其是巨噬细胞上的α7亚型(a7nAChR)。山莨菪碱通过阻断M胆碱受体,使体内更多的乙酰胆碱作用于巨噬细胞α7尼古丁受体,加强了乙酰胆碱对巨噬细胞α7尼古丁受体的激活作用,从而激活了胆碱能抗炎通路,达到治疗RA的作用。鉴于临床上单独使用山莨菪碱存在用药剂量大,容易产生阿托品样副作用的缺点,而且临床上单独使用胆碱脂酶抑制剂治疗容易引起乙酰胆碱蓄积导致心血管系统和消化系统的副作用。在此,我们首次提出将毒草碱受体阻断剂和胆碱脂酶抑制剂这两类药物以适当的比例联合使用(即复方山莨菪碱)的治疗方案来协同激活胆碱能抗炎通路,增强其抗炎效果并降低其副作用。为临床治疗RA提供新的治疗策略。而且,我们课题组之前的研究工作表明复方山莨菪碱即山莨菪碱和新斯的明联合治疗可以激活a7nAChR,已申请专利。因此,本课题对此复方治疗RA进行实验性研究和探索。研究方法：以胶原蛋白诱导的类风湿性关节炎模型在RA的研究过程中是较常见的,所以本研究首先以胶原蛋白诱导的关节炎DBA/1J小鼠为模型。利用整体动物实验方法研究山莨菪碱(25mg/kg, i.p)及新斯的明(50μg/kg, i.p)复方对小鼠关节炎的治疗作用,使用关节炎指数及足趾肿胀程度评估关节炎严重程度,影像学及组织学评分判断复方对其治疗的影响。并采用ELISA方法检测复方对血清炎症细胞因子(INFα, IL-6, IL-1β)的表达,及Ⅱ型胶原蛋白特异性抗体(IgG,IgG1,IgG2a)的表达影响。结果：1.用胶原蛋白诱导的关节炎模型(CIA),用复方治疗组小鼠关节炎程度明显减轻。关节炎评分治疗组小鼠明显低于对照组,通过治疗,治疗组小鼠的体重也高于对照组；2.影像学X光的结果表明治疗组与对照组相比骨质流失明显减少。Micro-CT的结果则表明用复方治疗后关节炎小鼠的骨侵蚀明显轻于对照组；3.组织学切片HE染色的结果显示治疗组小鼠的关节形态比较完整并且滑膜侵蚀程度也明显轻于对照组;4.血清中炎症因子的ELISA结果显示,用复方治疗后,血清中炎症因子(TNFα, IL-6, IL-1β)明显减少；5.血清中类风湿病的特定指标Ⅱ型胶原蛋白特异性抗体(IgG, IgG2a)在复方治疗后,治疗组比对照组明显较少。结论：山莨菪碱和新斯的明的联合治疗对实验性类风湿性关节炎有明显的治疗效果。