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本论文以玉米胚芽粕(CGM)为原料,从中制备了玉米胚芽清蛋白(CGMA)。以乙醇脱氢酶(ADH)激活率和羟自由基(·OH)抑制率为考察指标,采用酶解技术制备了具有醒酒护肝活性的玉米胚芽粕清蛋白肽(CGMAPs);通过超滤技术对CGMAPs进行分离得到了分子量在1k Da以下的玉米肽组份APF4;采用层析技术对APF4进行了分级分离和初步纯化;通过动物模型评价了APF4对急性酒精性中毒小鼠的醒酒作用和对急慢性酒精性肝损伤小鼠的护肝作用。全文的主要结论如下:(1)以CGM为原料,在40℃、浸提时间30min、料液比(g:m L)1:20条件下采用水提法制备了CGMA;以ADH激活率和·OH抑制率为考察指标,筛选出最佳酶制剂为Neutral中性蛋白酶;采用单因素和响应面试验优化得到制备醒酒护肝活性的CGMAPs最佳工艺条件为酶解温度50.63℃、酶解p H 6.94、酶底比4012.7 U/g、时间1.99 h、底物浓度1mg/m L。(2)采用截留分子量为3k Da和1k Da的超滤膜对CGMAPs进行分离,得到四个玉米肽组份:APF1(分子量>3k Da)、APF2(分子量<3k Da)、APF3(分子量1-3k Da)和APF4(分子量<3k Da);通过测定CGMAPs、APF1、APF2、APF3和APF4对小鼠血乙醇浓度的影响,筛选出与模型对照组相比可极显著降低血乙醇的组份APF4(P<0.01);将AFP4进行层析分离,以·OH抑制率为考察指标,对层析得到的五个组份F1、F2、F3、F4、F5进行筛选,其中F5表现出最佳的体外醒酒活性。(3)灌胃50%(v/v)乙醇溶液,通过筛选试验选出小鼠最大醉酒剂量为12m L/kg bw;在小鼠急性酒精性中毒模型下,评价了APF4对小鼠翻正反射消失时间、翻正反射恢复时间、醉倒率和24h内死亡率的影响,AFP4高剂量组800mg/kg bw可明显延长小鼠翻正反射消失时间、缩短翻正反射恢复时间,与乙醇模型组相比醉倒率也有所下降;同时APF4在降低小鼠血乙醇浓度方面表现出良好的剂量效应和时间效应,其中APF4中高剂量组(400mg/kg bw和800mg/kg bw)的效果较好(P<0.01);预先灌胃APF4 30min后灌胃50%(v/v)乙醇溶液12m L/kg bw,1h后检测小鼠肝脏乙醛脱氢酶(ALDH)和细胞色素P450 2E1(CYP2E1)含量,APF4各剂量组均升高了小鼠肝脏ALDH含量并抑制了CYP2E1含量的增加,其中APF4高剂量组(800mg/kg bw)效果极显著(P<0.01)。结果表明:APF4具有良好的促进乙醇代谢的作用,且APF4高剂量组(800mg/kg bw)效果最好。(4)在急性酒精性肝损伤模型下,预服APF4可保护乙醇代谢引起的肝脏生理指标的异常变化,高剂量组(800mg/kg bw)显著降低了小鼠肝脏谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性、肝脏甘油三酯(TG)含量和丙二醛(MDA)水平的升高(P<0.01),并抑制了乙醇代谢引起的总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性和还原型谷胱甘肽(GSH)含量的降低(P<0.01),但是对过氧化氢酶(CAT)活性的降低没有明显改善(P>0.05)。小鼠肝脏苏木精-伊红(H&E)染色显示,随着AFP4剂量的升高,乙醇代谢导致的肝组织损伤情况逐渐改善,高剂量组(800mg/kg bw)明显恢复了肝细胞索的结构,肝血窦空隙恢复正常,可见完整的细胞结构。结果表明:APF4具有抑制乙醇代谢引起的小鼠急性酒精性肝损伤的作用,并表现出良好的剂量效应关系,且高剂量的APF4(800mg/kg bw)护肝活性最佳。(5)在慢性酒精性肝损伤模型下,APF4高剂量组(800mg/kg bw)显著降低了小鼠肝脏ALT和AST活性、肝脏TG含量和MDA水平的升高(P<0.01),并抑制了乙醇代谢引起的T-SOD活性和GSH含量的降低(P<0.01),但是对CAT活性的降低没有明显改善(P>0.05)。小鼠肝脏H&E染色显示,AFP4表现出剂量效应关系,高剂量组(800mg/kg bw)效果最好,明显减少了肝细胞核周围脂滴的数量,肝细胞索结构清晰,以中央静脉为中心呈放射状排列,细胞结构完整,与正常对照组相比无明显差异。结果表明:APF4对乙醇引起的小鼠慢性酒精性肝损伤同样具有保护作用,APF4可作为护肝制剂长期服用。