【摘 要】
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目的:观察野生小鼠和脂联素基因敲除(APN-/-)小鼠发生胰岛素抵抗后胰岛素水平、心室重构程度、脂联素及脂联素受体1的表达变化,探讨脂联素对胰岛素抵抗所致心室重构的影响。
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目的:观察野生小鼠和脂联素基因敲除(APN-/-)小鼠发生胰岛素抵抗后胰岛素水平、心室重构程度、脂联素及脂联素受体1的表达变化,探讨脂联素对胰岛素抵抗所致心室重构的影响。方法:将雄性野生型小鼠8只作为胰岛素抵抗组(IR),采用随机法将雄性APN-/-小鼠24只分为基因敲除组(KO)、基因敲除+胰岛素抵抗组(KIR)和基因敲除+胰岛素抵抗组+脂联素干预组(APN),每组8只,基因敲除组给予普通饲料,其余三组给予高脂饲料,APN组同时给予腹腔注射外源性重组脂联素(10ug/kg.d)。12周时进行实验检测:检测前1天禁食水12小时,取鼠尾血测空腹血糖(FBG);取血清后测空腹胰岛素(FINS)、血清脂联素(APN)及血清MMP-9水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);取出心脏,分离出左心室并称其重量,计算左心室重量指数(LVWI)。采用HE染色观察心肌组织形态,Masson染色观察各组心肌胶原变化,采用免疫组化和Western Blot法测脂联素及脂联素受体1(Adipo R1)在心肌中的蛋白表达,采用实时荧光定量PCR法测定心肌APN及Adipo R1的m RNA表达。对以下指标做Pearson相关分析:HOMA-IR与血清MMP-9、LVWI、心肌细胞凋亡率、血清APN及心肌Adipo R1的表达做相关性分析。结果:(1)与IR组相比,KO组体重、FBG、FINS、HOMA-IR、血清APN及心肌APN的蛋白表达均明显降低;KIR组FBG、血清APN、心肌APN、心肌Adipo R1蛋白和m RNA表达均明显降低,而血清MMP-9及LVWI均明显升高;APN组FBG、FINS、HOMA-IR、血清MMP-9、LVWI及心肌细胞凋亡率均明显降低,而心肌Adipo R1的蛋白和m RNA表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)与KO组相比,KIR组体重、FINS、HOMA-IR、血清MMP-9、LVWI及心肌细胞凋亡率均明显升高,而心肌APN及Adipo R1表达降低;APN组FINS及血清MMP-9明显降低,而心肌APN蛋白表达、心肌Adip R1蛋白及m RNA表达明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)与KIR组相比,APN组FINS、HOMA-IR、血清MMP-9、LVWI及心肌细胞凋亡率均显著降低,而血清APN、心肌脂联素、心肌Adipo R1的蛋白和m RNA表达均明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)HE染色见IR组心肌细胞排列紊乱;KO组心肌细胞排列不规则,细胞核染色不均匀;KIR组心肌细胞排列紊乱程度加重,甚至见肌纤维断裂、变形等改变;APN组心肌排列较整齐,心肌纤维紊乱改善。Masson染色见,IR组蓝染的胶原纤维增多,心肌纤维化明显,KO组可见间质内蓝色胶原纤维分割心肌束;KIR组蓝染的胶原纤维加重,部分胶原纤维融合;APN组蓝染的心肌纤维明显减少。(5)Pearson直线相关分析见HOMA-IR与心室重构指标呈正相关,与心肌Adipo R1呈负相关。结论胰岛素抵抗可以导致心室重构,外源脂联素可以改善胰岛素抵抗所致的心室重构。
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