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前言:外伤或疾病引起的关节软骨损伤在临床上很常见,但软骨组织中不具有血管与神经,其损伤后不易自我修复.对于关节软骨损伤的修复在目前的骨科临床、基础研究中仍是一个重要的课题.如何体外大量扩增得到数量足够的自体软骨细胞以进行关节软骨缺损的组织工程方法修复是目前实验研究的重点.但以往的实验研究对象大多为胎兔或幼兔关节软骨细胞,其增殖能力明显好于成年兔.临床上关节软骨损伤或严重骨关节炎的患者多为老年或成年人,其自我修复能力极差,以往研究对此是不适用的.许多研究表明,生物活性因子在关节软骨的损伤、修复机制中,起着重要的调节作用.许多生长因子促进软骨细胞增殖和基质表达已被证实.其中,TGF-β<,1>就是一个重要的因子.我们以成兔的关节软骨细胞为对象,研究了TGF-β<,1>对其增殖和特异性基质合成的促进作用,为成人关节软骨细胞的体外培养扩增提供理论和临床依据.材料与方法:1.成年兔关节软骨细胞分离、培养:取18月龄的成年日本大耳白兔1只,处死,片状切取关节软骨,解剖刀将软骨切成1.0mm<3>大小碎块,消化,过滤,离心,收集关节软骨细胞,加入DMEM培养液(含20％胎牛血清、青霉素100U/ml,链霉素100U/ml),调整细胞密度为2.5×10<5>/ml,置于37℃,5％CO<,2>孵育箱内培养.2.倒置显微镜下观察软骨细胞生长状况.3.细胞爬片HE染色光镜下观察软骨细胞形态.4.MTT比色试验测定软骨细胞存活数及TGF-β<,1>促进其增殖的最佳浓度.5.细胞计数绘制生长曲线观察在TGF-β<,1>作用下软骨细胞的增殖情况.6.Ⅱ型胶原免疫组织化学检测证实在TGF-β<,1>作用下软骨细胞Ⅱ胶原的表达.7.采用方差分析法,进行统计分析.结论:在该实验中,我们成功地培养成活了成年兔关节软骨细胞.通过MTT检测软骨细胞存活数和细胞生长曲线及Ⅱ型胶原免疫组织化学检测,结果经过统计学处理分析,表明TGF-β<,1>对体外培养的成年兔关节软骨细胞具有明显的促进增殖和维持特异性基质合成的作用.