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寡聚糖作为一种应用于癌症诊断的新型标记物，在生命活动中起着重要的作用，在对寡聚糖进行组成和结构分析的前处理通常包括酶解，纯化，衍生等，该过程耗时长且损耗大，而微流控芯片平台为解决这一问题提供了一种途径。微流控芯片具有微型化、低成本、高通量等优势，以微流控芯片为平台酶解糖蛋白，可以集微型化和固定化酶的优点于一体，增加了酶的稳定性和重复使用次数，同时又方便操作，将酶解时间由原来的12h缩短至几分钟，实现低耗高效。 本文基于Polydimethylsiloxane（PDMS）芯片为平台，以“off-stoichiometry”TE（OSTE）为固定酶的材料，设计了一种微型酶解反应器，实现糖蛋白的在线酶解。本文通过研究影响酶解效率的因素来优化酶解条件，以找到最适合的酶解条件。实验中，通过统计整体柱的孔径和球径，来探究不同因素对整体柱比表面积的影响。其次通过统计不同条件下的酶固定效率，找到最适合固定酶的整体柱条件。在上述两块研究的基础上，以核酸核糖酶B为标准品，通过检测样品中酶解后的糖量找到最适合的酶解条件，同时对酶解条件如温度和底物量进行优化，以提高酶解效率。实验结果显示，随着致孔剂比例和单体中烯基比例的提高，酶固定效率也有所提高，在流速为1.4μm/min，反应温度为37℃时，核酸核糖酶B可以完全酶解。本文所设计的微型酶解反应器也适用于酶解含唾液酸的糖，为糖蛋白在线分析提供了一个新的平台。 基于3D打印芯片的技术，本文还探究了用水凝胶固定酶的微型酶解反应器，利用水凝胶的三维结构固定酶，结果显示单体比为7％的时候水凝胶已经可以固定酶，为进一步研究它的酶解效率奠定了基础。此外本文还利用二通阀和毛细管，将PDMS芯片与ESI-MS的喷针连接起来，借助LC的泵为驱动力，在接口处形成稳定的喷雾，并用ESI检测到较强的信号，为芯片的在线分析了奠定了基础。