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目的1、检测鼻咽癌中WWOXmRNA表达情况,分析其与临床病例特征的关系,探讨其在鼻咽癌可能发生的作用。2、检测鼻咽癌中WWOX基因启动子区甲基化状态,分析其与临床病例特征、WWOXmRNA表达的关系。3、检测鼻咽癌WWOX基因杂合性缺失的情况,分析其与临床病例特征、WWOXmRNA表达的关系。4、分析WWOXmRNA表达和启动子区甲基化、杂合性缺失之间的关系,探讨影响鼻咽癌WWOXmRNA表达的作用机制。方法分别通过RT-PCR、甲基化特异性PCR、变性的PAGE电泳检测细胞株、鼻咽癌组织及鼻咽部粘膜慢性炎组织中WWOXmRNA表达情况、WWOX基因启动子区甲基化水平、微卫星位点中杂合性缺失的状态。结果1、鼻咽癌细胞株CNE1和CNE2的WWOX mRNA均表达缺失,正常鼻咽上皮细胞株NP69表达正常。在检测的65例鼻咽癌组织标本中,有31例癌组织标本WWOXmRNA表达缺失或降低,在同时收集的43例粘膜慢性炎组织中,WWOXmRNA均表达正常。统计学分析表明,鼻咽癌组织与非鼻咽癌组织二者WWOX mRNA表达水平差异有统计学意义(P<0.05)。鼻咽癌组织中临床分期Ⅰ~Ⅱ期WWOX mRNA表达明显高于Ⅲ~Ⅳ期(P<0.05);WWOX mRNA表达与年龄、性别、组织学类型、侵袭程度、淋巴结转移、远处转移无关,差异无统计学意义(P>0.05)。2、鼻咽癌细胞株CNE1和CNE2的WWOX启动子区均甲基化,正常鼻咽上皮细胞株NP69为非甲基化。在检测的65例鼻咽癌组织标本中,有37例癌组织标本WWOX启动子区出现甲基化,占56.9%。在同时收集的43例对照组中,0例出现WWOX启动子区甲基化。统计学分析表明,鼻咽癌组织与非鼻咽癌组织二者在WWOX启动子区甲基化水平差异有统计学意义(P<0.05)。WWOX启动子区甲基化与年龄、性别、临床分期、侵袭程度、淋巴结转移、远处转移无关,差异无统计学意义(P>0.05);WWOX mRNA表达与其启动子区甲基化呈负相关(rs=-0. 582, P=0. 000)。3、在65例鼻咽癌组织标本中,有29例(44.6%)至少在一个位点存在LOH,在43例粘膜慢性炎对照组标本中,仅有2例(4.7%)LOH,统计学分析表明,鼻咽癌组织与非鼻咽癌组织二者在WWOX出现LOH差异有统计学意义(P<0.05)。WWOX发生LOH与年龄、性别、组织学类型、临床分期、侵袭程度、淋巴结转移、远处转移无关,差异无统计学意义(P>0.05);WWOX mRNA表达与其杂合性缺失相关性分析无统计学意义(rs=-0. 196, P=0. 117)。4、WWOX基因mRNA表达与甲基化、杂合性缺失呈负相关,且有统计学意义(rs=-0. 546, P=0.000)。结论:1、WWOX mRNA在鼻咽癌细胞株、鼻咽癌组织中缺失或表达降低为高频事件,与鼻咽癌的临床分期有关,提示WWOX的异常表达可能参与鼻咽癌的发生、发展。2、在鼻咽癌细胞株、鼻咽癌组织中WWOX启动子区甲基化为高频事件,与鼻咽癌组织中WWOX的异常表达有关。3、在鼻咽癌组织中WWOX基因发生LOH为高频事件,但与鼻咽癌组织中WWOX的异常表达相关性无统计学意义。4、WWOX mRNA表达缺失在鼻咽癌的发生发展中起重要作用。WWOX启动子区甲基化及杂合性缺失可能是鼻咽癌中WWOX基因表达沉默的重要机制之一。