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局灶节段性肾小球硬化（focal segmental glomeruloscerosis，FSGS）是导致儿童及成人肾脏疾病持续进展至终末期肾衰最常见的原发性肾小球肾炎的病理类型之一[1]。临床表现多样，其肾脏病理表现会随疾病的进展出现全小球硬化，肾小管的萎缩和间质纤维化也逐渐增多呈弥漫性分布。如何阻断或延缓局灶节段性肾小球硬化疾病的进展是目前临床和基础研究的一个热点。目前研究发现肾组织中有多种细胞因子与FSGS发生有关，依作用不同将加速FSGS发展的物质称为正向调控因子，代表物质如转化生长因子β1(transforming growth factorβ1，TGF-β1)，结缔组织生长因子(connective tissue growth factor，CTGF)等;将抑制FSGS发展的物质称为负向调控因子如肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor，HGF），骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein，BMP)等。HGF和TGF-β1是两种主要影响FSGS肾病发展的细胞因子，并且两者存在一定负向相关性。他克莫司(tacrolimus，FK506)做为一种新型的免疫抑制剂，目前主要用于器官移植，而在治疗肾小球疾病，尤其是FSGS方面的研究尚少。本实验通过观察FK506对FSGS大鼠24h尿蛋白定量、肾功能、肾组织中HGF、TGF-β1的影响，旨在探讨FK506对FSGS的治疗作用及其可能机制。
目的：
1.观察HGF和TGF-β1在FSGS大鼠肾组织中的表达，并研究两种细胞因子在FSGS发生发展中的作用;2.观察他克莫司对FSGS大鼠的治疗作用，探讨其可能的机制。
方法：
选取健康雄性SD大鼠24只，适应性喂养一周（0周）后，随机分为3组:正常对照组（A组，n=8），模型组（B组，n=8），及他克莫司治疗组（C组，n=8）。除正常对照组外，余16只大鼠采用单侧肾切除加尾静脉分次注射阿霉素法建立FSGS大鼠模型，他克莫司治疗组于第4周开始给予治疗，每日予他克莫司1mg/kg，配成水溶液灌胃至实验第8周，于实验第0周、4周、8周分别测定24小时尿蛋白排泄量(24hUP)，第8周测定血总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、胆固醇(Cho)、尿素氮(BUN)及肌酐(Scr)等生化指标。于实验结束后取剩余肾做光镜检查;免疫组织化学法及Western blot检测肾脏组织中HGF及TGF-β1的表达。
结果：
1.血、尿生化值:
(1)FSGS大鼠模型建立:与正常对照组比较，模型组与他克莫司治疗组大鼠4周末、8周末24hUP及8周末血清Cho、BUN均显著升高，8周末血清TP及Alb均显著降低，差异有统计学意义。
(2)他克莫司治疗组生化值改变:实验8周末时，与模型组比较，他克莫司治疗组大鼠24hUp和Cho、Scr均降低，差异有统计学意义(P＜0.05)，血清Alb升高，差异有统计学意义(P＜0.05)。
2.病理学观察:
光镜下可见:8周末，光镜下对照组大鼠肾组织病理正常。模型组可见肾小球出现不同程度的局灶节段性硬化，病变肾小球内可见明显节段性系膜基质增多和球囊粘连、上皮细胞空泡变性;肾间质灶状淋巴细胞和单核细胞浸润。治疗组病理改变较模型组明显减轻。
3.免疫组化结果显示:
(1)HGF:对照组肾组织内有少量HGF表达。模型组及治疗组肾组织内HGF表达较对照组增加，治疗组更明显。组间差别有统计学意义。
(2)TGF-β1:与模型组相比，他克莫司治疗组肾小球TGF-β1的表达减少，差异有统计学意义(P＜0.001)，模型组、治疗组与正常对照组比较TGF-β1表达增多，组间差别有无统计学意义。
4.Western blot结果显示:
(1)HGF:模型组HGF蛋白较正常组表达虽有增加，但差异无统计学意义，治疗组较正常组及模型组均增加，差异有统计学意义。
(2)TGF-β1:模型组及治疗组肾组织TGF-β1表达高于正常组，差异有统计学意义(P＜0.05)，并且治疗组低于模型组，差异有统计学意义(P＜0.05)。
结论：
1.单侧肾切除加尾静脉分次注射阿霉素法为我们研究如何延缓FSGS的进展提供了一个组间差异小，稳定性和重复性好的实验动物模型。
2.HGF在FSGS表达增高，发挥保护肾脏和促进修复的作用，在一定程度上能抑制肾小管间质纤维化。
3.TGF-β1在肾组织中的过量表达参与并促进了FSGS的发生发展，肾组织TGF-β1的水平可能可以作为判断FSGS病变程度的指标。
4.他克莫司能够显著降低蛋白尿，上调HGF和下调TGF-β1的表达，减轻肾小球硬化的程度，对FSGS大鼠肾脏具有一定的保护作用。