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目的:课题组前期实验发现九龙藤总黄酮(Bauhinia championii flavones,BCF)有抗自噬和抗凋亡的作用,本实验研究BCF对心肌缺血/再灌注损伤程序性坏死的调控作用。方法:1.本实验分为体外实验和体内实验两部分,体外实验选取培养3~4 d、生长良好、搏动规律的原代心肌细胞,建立缺氧/复氧损伤(hypoxia/reoxy-genation injury,H/R,缺氧2 h./复氧12 h.及24 h.)模型;体内实验将120只SD大鼠随机分为假手术、模型、BCF组(20 mg·kg-1)、BCF+Nec-1组、Necrostatin-1(0.6 mg·kg-1)五组(n=8),采取冠状动脉左前降支结扎的方法制备大鼠心肌缺血/再灌注损伤(缺血30 min.再灌注12h.及24 h.)模型。2.体外实验用紫外分光光度计法测定正常、模型、BCF(终浓度100mg·L-1)、BCF+Nec-1、Nec-1(终浓度100 mg·L-1)共五组心肌细胞缺氧2h./复氧12 h.及24 h.细胞培养上清液T-AOC、TNF-α含量;以Western-blot法检测受体相互作用蛋白激酶3(RIPK3)蛋白的表达;用流式细胞术检测心肌细胞坏死率。3.体内实验查看造模前后大鼠Ⅱ导联心电图的改变,用紫外分光光度法检测假手术、模型、BCF、BCF+Nec-1、Nec-1五组心肌缺血30min/再灌注12h.及24h.总抗氧化能力(T-AOC)及血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活力;以Western-blot法检测心肌微管相关蛋白轻链3蛋白-Ⅱ(LC3-Ⅱ)、自噬体相关蛋白Beclin-1、受体相互作用蛋白激酶3(RIPK3)蛋白的表达。结果:1.九龙藤总黄酮对缺氧/复氧模型大鼠心肌细胞培养上清液T-AOC、TNF-α及心肌细胞RIPK3蛋白表达及心肌细胞坏死率的影响。与模型组相比,BCF、BCF+Nec-1预处理均可显著增加两个测试时间段T-AOC,减低TNF-α含量,下调RIPK3蛋白表达,降低心肌细胞坏死率(P<0.05);BCF作用不及Nec-1组作用效果明显;以BCF+Nec-1组效果最好(P<0.05)。2.九龙藤总黄酮对缺血/再灌注损伤大鼠血清T-AOC、iNOS、CK-MB及心肌组织LC3-Ⅱ、Beclin-1、RIPK3蛋白表达的影响与模型组相比,BCF和Nec-1均能增强总抗氧化力,降低血清iNOS及CK-MB含量,下调LC3-Ⅱ、Beclin-1和RIPK3蛋白表达(P<0.05或P<0.01);BCF作用不及Nec-1组作用效果明显;但与Nec-1相比,BCF+Nec-1组能显著降低血清iNOS及CK-MB含量,提高T-AOC水平(P<0.05或P<0.01)。结论:九龙藤总黄酮预处理可减轻心肌缺血/再灌注损伤,其机制可能与提高心肌细胞总抗氧化力,抑制心肌缺血/再灌注损伤后心肌细胞程序性坏死有关.