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本论文研究了两种微生物来源的黑曲霉蛋白酶和枯草芽孢杆菌蛋白酶的酶学性质,选取豆粕为底物进行酶解试验,进行了酶解产物的SDS-PAGE分析;通过动物饲养试验、消化试验以及动物血清相关生化指标和肠道消化酶活性测定等进行了两种蛋白酶在断奶仔猪玉米-豆粕型日粮中应用的比较研究。
结果表明:
(1)试验所用的蛋白酶的最适温度为60℃,最适pH值为3.0;枯草芽孢杆菌蛋白酶的最适温度为50℃,最适pH值7.5。Ca2+、Mn2+对黑曲霉蛋白酶和枯草芽孢杆菌蛋白酶的酶活力有不同程度的促进作用。
(2)在建立体外最佳酶促反应条件的基础上研究了黑曲霉蛋白酶和枯草芽孢杆菌蛋白酶对体外豆粕水解效率的影响。从总水解度、水溶性蛋白水解度、粗蛋白消化率等指标评估水解效果,黑曲霉蛋白酶的水解效果优于枯草芽孢杆菌蛋白酶。
(3)对酶解产物进行SDS-PAGE凝胶电泳分析,黑曲霉蛋白酶的酶解产物分布于10-25KD的比例要多于枯草芽孢杆菌蛋白酶。比较而言,黑曲霉蛋白酶的酶解产物可得到更多的低分子多肽。
(4)在动物饲养试验中,在21-50日龄,黑曲霉蛋白酶组的平均日增重与对照组相比,提高了6.67%(p<0.05),料重比比对照组降低了11.53%(p<0.05)。
(5)加酶组与对照组相比提高了血清总蛋白含量,降低了血清尿素氮浓度。黑曲霉蛋白酶组与枯草芽孢杆菌蛋白酶组的血清总蛋白分别比对照组提高了5.47%、2.47%(p>0.05)。
(6)加酶组可以提高断奶仔猪十二指肠淀粉酶的活性,但差异不显著(p>0.05),其中黑曲霉蛋白酶组比对照组提高了5.17%%;对于十二指肠胰蛋白酶的活性,黑曲霉蛋白酶组比对照组相比,提高了9.39%(p>0.05)。
(7)在消化试验中,仔猪日粮中添加蛋白酶能够提高能量、粗蛋白的利用率,黑曲霉蛋白酶组与对照组相比,能量的表观消化率的提高幅度为4.86%(p>0.05),粗蛋白质的表观利用率提高3.42%(p>0.05)。