抗卵蛋白IgE、IgG抗体的ELISA方法建立及针刺对致敏大鼠血清特异性抗体产生的影响

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目的: 建立血清anti-OVA IgE、anti-OVA IgG的ELISA方法,探讨针刺对致敏大鼠血清特异性抗体产生的影响。 方法: 用间接ELISA建立致敏大鼠血清anti-OVA IgE、anti-OVA IgG的检测方法。用建立的方法动态检测大鼠致敏后20天内血清anti-OVA IgE、anti-OVA IgG的变化。同时复制大鼠哮喘模型,将大鼠右肺第一叶制成石蜡切片,用甲苯胺蓝染色,计数MC,观察MC脱颗粒变化。 结果: 1.确定了血清anti-OVA IgE、anti-OVA IgG间接ELISA方法的最佳操作流程和工作参数,可特异性检测anti-OVA IgE、anti-OVA IgG。用本方法检测阳性血清anti-OVA IgE的三次重复实验平均批内差异为7.17%,平均批间差异为4.82%;检测阳性血清anti-OVA IgG的三次重复实验平均批内差异为2.89%,平均批间差异为3.98%。 2.大鼠OVA致敏后anti-OVA IgE、anti-OVA IgG明显升高,并且在14天时达到第一个最高峰,随后稍有下降;第二个高峰anti-OVA IgE出现在18天,anti-OVA IgG出现在20天。 3.针刺组在6、18天能够明显降低血清anti-OVA IgE,在18天能够明显降低血清anti-OVA IgG的产生(P均<0.05),显示针刺可以影响anti-OVA IgE、anti-OVA IgG抗原特异性抗体的产生。针刺对照组(置高空)在6、8、10、14、18天能明显降低血清anti-OVA IgE,在6天及以后每个时间点都能够明显降低血清anti-OVA IgG(P均<0.05),表明置高空也可以影响抗原特异性抗体的产生。 4.激发组与未激发组MC计数比较有显著性差异(P=0.003),但针刺对大鼠肺组织MC计数没有明显影响。 结语: 1.成功建立了大鼠血清anti-OVA IgE、anti-OVA IgGIN接ELISA方法。 2.证明OVA致敏SD大鼠后,其血清anti-OVA IgE、anti-OVA IgG明显升高。 3.针刺可通过影响anti-OVA IgE、anti-OVA IgG抗原特异性抗体的产生,对致敏过程发挥免疫调节作用。 4.针刺对大鼠肺组织MC脱颗粒没有明显影响,需要进一步改进方法,研究针刺对不同状态MC的影响。
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