乳腺纯型粘液腺癌microRNA表达谱及免疫组化特征的相关性研究

来源 :天津医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:joshua5201314
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目的乳腺纯型粘液腺癌(PMBC)是一种罕见的浸润型乳腺癌病理类型,因在肿瘤内产生大量粘液而得名。MicroRNA是一种不编码蛋白的内源性RNA,长度约22nt,通过与编码蛋白质的mRNA互补结合,沉默其表达,对细胞分化、生长、增值、代谢、凋亡等过程起调控作用。而肿瘤的发生、发展正是细胞无限增殖和凋亡失控的结果,研究表明,多种miRNA参与了癌细胞重要的生物程序的调控,间接起着促癌基因和抑癌基因的功能,在肿瘤的发生和发展中起了至关重要的作用。免疫组织化学是利用抗原与特异性结合的原理,通过化学反应使标记的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究。本文将通过对乳腺纯型粘液腺癌及癌旁正常组织中miRNA的检测、纯型粘液腺癌及浸润型导管癌免疫组化指标的测定,并对相关病例临床资料进行分析,探讨纯型粘液腺癌miRNA表型及免疫组化特征。方法选取2009年3月至2011年2月天津医科大学附属肿瘤医院收治的11例手术治疗的PMBC患者,病理均经病理科确认。所有患者术前均未进行放疗或化疗。所选病例术中均留取新鲜乳腺癌及癌旁正常组织,从中选取一对行miRNA芯片检测,从检测结果中筛选出癌组织与癌旁组织具有表达差异的niRNA,利用实时荧光定量PCR技术在其余10对癌与癌旁组织中进行验证。另选取2004年3月至2006年2月天津医科大学附属肿瘤医院收治的31例PMBC及27例浸润性导管癌石蜡包块行免疫组化检钡ER、PR、Her-2、Ki-67、Bcl-2、P53、PCNA、CK5&6的表达。所有病例的临床资料进行回顾性分析。采用SPSS16.0软件进行处理。Real time PC试验数据用均数±标准差(Mean±SD)表示,根据数据处理的不同方法及统计学处理的不同要求,选用方差分析、相关性检验或t检验进行分析。免疫组化数据根据数据处理的不同方法及统计学处理的不同要求,采用χ2检验或t检验进行分析。以P<0.05作为统计学差异显著性测定界限。结果1、miRNA基因芯片检测出在癌与癌旁正常组织中具有差异表达的miRNA为145个,以差异倍数FC (Fold Change)≧3为筛选标准,并且根据文献报道,进一步筛选出10个miRNA利用实时荧光定量技术进行验证,发现miR-143和miR-224-5p在纯型粘液腺癌组织中显著低表达,表达水平的改变具有统计学差异,变化方向与芯片结果一致。2、纯型粘液腺癌免疫组化特征为:ER阳性率高(27/31)、PR阳性率高(28/31)、Her-2阳性率低(0/31)、Ki-67显著低表达。大部分纯型粘液腺癌可被归为LuminalA型。3、纯型粘液腺癌与浸润型导管癌免疫组化特征比较:纯型粘液腺癌显示出显著的高ER阳性率(P<0.001)、低Her-2阳性率(P<0.001)、低细胞扩增率(P<0.001)。我们的结果与文献资料报道一致。结论1、在以往的文献中曾报道过miR-143和miR-224-5p在肿瘤组织中表达上调或下降,这些肿瘤组织包括前列腺癌、直肠癌、膀胱癌、肾癌、肝细胞癌等。通过我们的研究首次发现这两种miRNA在纯型粘液腺癌组织中低表达,这将有助于帮助我们更好地了解此种特殊类型乳腺癌发病的分子机制。2、纯型粘液腺癌高ER阳性率、高PR阳性率、低Her-2表达率、低Ki-67表达率,大部分纯型粘液腺癌可被归入Luminal A型。3、与浸润型导管癌相比,纯型粘液腺癌显示出显著的高ER阳性率、低Her-2阳性率、低细胞扩增率。这些特征可能是纯型粘液腺癌比浸润型导管癌患者预后好的原因之一。
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