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沙棘(Hippophae rhamnoides L.)是胡颓子科(Elaeagnaceae）沙棘属（Hippophae）的落叶灌木或乔木，广泛分布于欧亚大陆温带地区，是一种重要的中藏药材，具有悠久的药用历史，同时，沙棘也是青海省重要的生态经济林浆果植物。根据研究，沙棘中除含有大量的维生素、脂肪酸以及微量元素等营养成分以外，还含有丰富的黄酮及多酚类活性成分，具有抗氧化、降血脂、降血糖、保护心血管等功效。 沙棘Vp是以沙棘中生物类黄酮为主要成分的有效物质群，其主要成分为儿茶素、白花青素、花青素等多酚类和黄酮类化合物，沙棘Vp具有增强毛细血管壁韧性、保护血管、降血脂等功效。为了进一步研究沙棘Vp的活性成分以及药理作用机制，本论文对沙棘果实进行了高纯度沙棘Vp的制备以及心血管活性机制的研究，取得了以下的结果和结论。 1、利用单因素结合响应面的实验方法确定了沙棘Vp的提取工艺。通过单因素实验筛选超声时间、超声温度、料液比、乙醇体积分数四个主要因素，以沙棘Vp提取得率为响应值进行Box-behnken中心组合实验设计，建立沙棘Vp提取得率的最佳提取工艺。结果表明，在超声时间2.5h，超声温度为65℃，料液比为1∶4，乙醇体积分数为55％的条件下，沙棘Vp平均提取得率为9.02％±0.03％，与模型预测值基本吻合。 2、利用大孔吸附树脂对提取所得的沙棘Vp进行了纯化工艺研究。实验采用了AB-8、D101、HPD-100、HPD-600、HPD-826五种大孔吸附树脂，考察了五种大孔吸附树脂的吸附性能和对沙棘Vp的纯化能力。实验结果表明，HPD-100、HPD-826、HPD-600、D101、AB-8五种树脂均具有纯化沙棘Vp的作用，其中，D101型大孔吸附树脂对沙棘Vp的纯化能力最佳，最终的纯化工艺流程为:上样量为4BV，室温下吸附1h，选用60-80％乙醇进行洗脱，解析，收集洗脱液，便可得到纯度在90％以上的沙棘Vp提取物。 3、沙棘Vp中的活性成分表征。利用质谱以及高分辨质谱对沙棘Vp进行成分的化学结构表征，根据化合物的紫外图谱以及质谱数据，对照文献推测其中两种化合物分别为异鼠李素-3-O-芸香糖苷(Isorhamnetin-3-O-rutinoside)，异鼠李素-3-O-葡萄糖苷(Isorhamnetin-3-O-glucoside)。 4、不同工艺制备沙棘Vp降血脂功能比较。利用高血脂大鼠模型，沙棘Vp、企业提供沙棘Vp、沙棘Vp+Vc为受试药物，检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)以及低密度脂蛋白(LDL)，分析沙棘Vp对体重和脏器指数的影响。比较三个样品的降血脂功效，评价沙棘Vp与Vc的协同作用。结果表明，本实验室纯化的沙棘Vp的降血脂功效显著优于沙棘Vp产品，经过纯化的沙棘Vp具有更高效的生物活性。此外，沙棘Vp与Vc具有协同降血脂的功效。 5、体外血管环实验考察沙棘Vp对高血脂大鼠主动脉血管内皮功能的影响。建立高血脂大鼠模型，灌胃给予沙棘Vp，取大鼠主动脉，制备血管环，采用体外恒温组织浴槽及多导生理记录仪进行体外血管环实验，检测内皮依赖性血管舒张功能及非内皮依赖性血管舒张功能，同时检测一氧化氮合酶(NOS)底物左旋精氨酸(L-arginine，L-arg)或抑制剂Nω-硝基-L-精氨酸甲酯(Nω-Nitro-L-Arginine Methyl Ester，L-NAME)对内皮依赖性血管舒张功能影响。结果显示:模型组大鼠主动脉血管环对乙酰胆碱(acetylcholine，Ach)的内皮依赖性舒张功能明显降低，这种舒张可完全被NOS抑制剂L-NAME阻断，NOS底物L-arg可改善模型组大鼠主动脉血管环的舒张功能，而沙棘Vp对高血脂症大鼠主动脉内皮完整有保护作用。 6、沙棘Vp降血脂及血管保护的分子机制研究。利用高血脂大鼠模型，灌胃给予沙棘Vp; HE染色法观察血管及肝脏形态，电镜观察血管内皮及平滑肌细胞形态。采用TBA比色法检测肝脏及血清丙二醛(MDA)含量、WST-1法检测肝脏及血清超氧化物歧化酶(SOD)活力、检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)以及低密度脂蛋白(LDL)。Elisa方法检测血管内皮生长因子(VEGF)、血管细胞粘附因子(VCAM-1)、心肌肌钙蛋白(cTnI)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素(IL-6)。Western blot和PCR法检测主动脉内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、氧化低密度脂蛋白受体(LOX-1)、细胞间黏附分子(ICAM-1)的蛋白和mRNA表达水平。结果表明，沙棘Vp在7-28mg/kg的剂量下，可以显著改善高血脂大鼠血清血脂水平，可以显著增高肝脏及血清SOD活力，降低肝脏及血清MDA含量，降低VEGF、VCAM-1、TNF-α、IL-6的表达，降低主动脉eNOS、iNOS、LOX-1、ICAM-1的蛋白及mRNA水平。说明沙棘Vp可以有效保护由高血脂症引起的血管内皮功能紊乱。