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目的:建立紫外分光光度法测定马兰中总蒽醌的含量的、优选马兰总蒽醌的最佳提取纯化工艺;马兰中大黄素的最佳提取工艺研究;马兰纯化物制备透皮凝胶膏剂的成型工艺研究;马兰透皮凝胶膏剂治疗肝纤维化初步药效学研究。
方法:以马兰总蒽醌为评价指标,采用紫外分光光度法,通过单因素试验和正交试验优选马兰总蒽醌提最佳取工艺和纯化工艺;以大黄素含量为评价指标,采用高效液相色谱法,通过单因素和正交试验优选马兰大黄素最佳提取工艺;以黏附性、皮肤追随性、膜残留量、外观为评价指标,采用有限制条件的混料均匀试验法优选马兰透皮凝胶剂最佳处方基质配比;以离体细胞试验和CCl4肝纤维化模型敷脐法试验研究马兰凝胶膏剂治疗肝纤维化的作用。
结果:马兰总蒽醌的最佳提取工艺为:回流法提取次数为3次,提取时间每次1h,提取温度为85℃,提取溶剂为70%乙醇溶液,料液比为1∶10,最佳工艺条件下提取的马兰总蒽醌含量为9.273mg/g(以生药计)。马兰中大黄素最佳提取纯化工艺参数为:甲醇用量为20倍量,回流温度为70℃,提取次数为3次,提取时间为每次1h,最佳工艺条件下马兰中大黄素含量为43.92μg/g(以生药计)。纯化工艺选择AB-8型大孔吸附树脂对马兰总蒽醌进行纯化,上样药液浓度为0.1g/(以含生药量计),最佳纯化工艺参数为:3BV上样量,流速为1BV/h动态上样,8BV水洗量,流速为1BV/h水洗,7BV95%乙醇洗脱,洗脱流速为1BV/h,此条件下,AB-8大孔吸附树脂纯化马兰总蒽醌的转移率为50.13%,马兰总蒽醌纯度为14.67%。在成型工艺研究中,确定马兰凝胶膏剂最佳的基质配比为NP-700∶甘油∶纯水∶Al(OH)3∶酒石酸∶薄荷脑=0.0970∶0.5485∶0.3475∶0.0110∶0.0035∶0.0132。最佳基质配比制得的凝胶膏剂为黄棕色、表面光滑、质地均匀、无明显气泡、黏性好。不同浓度的总蒽醌能抑制肝星状细胞凋亡,与剂量成正比关系,马兰凝胶膏剂能抑制CCl4引起的肝纤维化模型中血清肝功能的表达,对肝纤维化大鼠的治疗与模型组比较具有显著性疗效。
结论:马兰总蒽醌的提取、纯化工艺稳定、可行,所制得纯化物中总蒽醌纯度从3%提高到14.67%。马兰中大黄素的最佳提取工艺稳定、可行,在此工艺参数下提取得到大黄素含量为43.92μg/g,大黄素含量比文献中的含量高1.87倍。在最佳基质配比条件下制备的马兰凝胶膏剂成型性号,各指标符合要求,制备工艺稳定可行。马兰透皮凝胶膏剂可抑制肝星状细胞的凋亡,马兰透皮凝胶膏剂对CCl4引起的肝纤维化模型大鼠具有一定疗效,可采用敷脐法治疗肝纤维。
方法:以马兰总蒽醌为评价指标,采用紫外分光光度法,通过单因素试验和正交试验优选马兰总蒽醌提最佳取工艺和纯化工艺;以大黄素含量为评价指标,采用高效液相色谱法,通过单因素和正交试验优选马兰大黄素最佳提取工艺;以黏附性、皮肤追随性、膜残留量、外观为评价指标,采用有限制条件的混料均匀试验法优选马兰透皮凝胶剂最佳处方基质配比;以离体细胞试验和CCl4肝纤维化模型敷脐法试验研究马兰凝胶膏剂治疗肝纤维化的作用。
结果:马兰总蒽醌的最佳提取工艺为:回流法提取次数为3次,提取时间每次1h,提取温度为85℃,提取溶剂为70%乙醇溶液,料液比为1∶10,最佳工艺条件下提取的马兰总蒽醌含量为9.273mg/g(以生药计)。马兰中大黄素最佳提取纯化工艺参数为:甲醇用量为20倍量,回流温度为70℃,提取次数为3次,提取时间为每次1h,最佳工艺条件下马兰中大黄素含量为43.92μg/g(以生药计)。纯化工艺选择AB-8型大孔吸附树脂对马兰总蒽醌进行纯化,上样药液浓度为0.1g/(以含生药量计),最佳纯化工艺参数为:3BV上样量,流速为1BV/h动态上样,8BV水洗量,流速为1BV/h水洗,7BV95%乙醇洗脱,洗脱流速为1BV/h,此条件下,AB-8大孔吸附树脂纯化马兰总蒽醌的转移率为50.13%,马兰总蒽醌纯度为14.67%。在成型工艺研究中,确定马兰凝胶膏剂最佳的基质配比为NP-700∶甘油∶纯水∶Al(OH)3∶酒石酸∶薄荷脑=0.0970∶0.5485∶0.3475∶0.0110∶0.0035∶0.0132。最佳基质配比制得的凝胶膏剂为黄棕色、表面光滑、质地均匀、无明显气泡、黏性好。不同浓度的总蒽醌能抑制肝星状细胞凋亡,与剂量成正比关系,马兰凝胶膏剂能抑制CCl4引起的肝纤维化模型中血清肝功能的表达,对肝纤维化大鼠的治疗与模型组比较具有显著性疗效。
结论:马兰总蒽醌的提取、纯化工艺稳定、可行,所制得纯化物中总蒽醌纯度从3%提高到14.67%。马兰中大黄素的最佳提取工艺稳定、可行,在此工艺参数下提取得到大黄素含量为43.92μg/g,大黄素含量比文献中的含量高1.87倍。在最佳基质配比条件下制备的马兰凝胶膏剂成型性号,各指标符合要求,制备工艺稳定可行。马兰透皮凝胶膏剂可抑制肝星状细胞的凋亡,马兰透皮凝胶膏剂对CCl4引起的肝纤维化模型大鼠具有一定疗效,可采用敷脐法治疗肝纤维。