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双酚A(BisphenolA,简称BPA),作为一种典型的环境内分泌干扰物,广泛应用于化工行业,在生产和使用过程中通过废水或废物进入水环境,造成各种水体的污染,对水生态系统的健康稳定构成了潜在威胁。狐尾藻(Myriophyllum verticillatum)和伊乐藻(Elodeacanadensis)作为沉水植物的重要代表,能够净化水体,是水体污染修复的先锋植物。同时,广泛分布在植物体内的内生菌不仅能促进植物生长,而且可以增强植物体对环境污染物的降解,减轻污染物对植物体的毒害。因此,以狐尾藻和伊乐藻为实验材料,开展降解BPA内生菌的筛选鉴定、降解特性和降解机理的相关研究,有助于了解水生生态系统中BPA的归趋,阐明沉水植物降解BPA的内在机制,对污染水体中BPA的生物修复有指导作用。本文首次从沉水植物内生菌中分离到了降解BPA的新型菌株,并对高效菌株的降解特性、降解机理等进行探索,为环境中BPA的归趋研究及水体BPA的污染治理奠定理论基础。研究结果如下:(1)从沉水植物狐尾藻中分离筛选到了降解环境内分泌干扰物双酚A的内生细菌Mv32。通过摇瓶实验进行了菌株降解条件的优化和降解特性的探索,发现当BPA初始浓度为10 mg/L时,菌株Mv32的最佳降解条件为接种量1%,初始pH值7,温度25℃,在该条件下,菌株最大生长浓度OD600达到0.22,3d对10mg/L BPA的降解率达到47.17 ± 1.22%。经过对其形态特征和16S rRNA基因同源性序列分析,鉴定菌株Mv32为类芽孢杆菌属(Paenibacillussp.)。投加菌株Mv32(OD600=1.0,1%),对于南湖水样中BPA(10 mg/L)3d的去除率为95.78 ±0.31%。(2)从沉水植物伊乐藻中分离筛选到了降解双酚A的内生细菌Ec18,并进行了菌株降解条件的优化和降解特性的探索,发现当BPA初始浓度为10 mg/L时,菌株Ec18的最佳降解条件为接种量2%,初始pH值6,温度30℃,在该条件下,菌株最大生长浓度OD600达到0.23,3 d对10 mg/L BPA的降解率达到40.59 ±0.60%。经过对其形态特征和16S rRNA基因同源性序列分析,鉴定菌株Ec18为甲基杆菌属(Methylobacterium sp.)。菌株Ec18(OD600=1.0,1%)对投加于南湖水样中的 BPA(10 mg/L)3 d 的去除率为 68.47 ± 1.91%。(3)通过添加特异性酶抑制剂对降解菌株去除BPA影响的实验,探索可能参与BPA降解的酶。结果表明,P450酶抑制剂和漆酶抑制剂能够显著抑制菌株对BPA的降解,推测P450酶和漆酶参与了 BPA的生物转化过程。此外,利用简并引物CulAF和Cu2R扩增得到漆酶的部分序列,经过对扩增序列的分析,发现该序列与已报道漆酶氨基酸序列的覆盖率为97%,相似性高达79%,推测该序列为新型细菌漆酶基因。