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丙型肝炎病毒（HCV）为单股正链RNA病毒，感染了全世界约1.7亿人，可导致慢性肝炎、肝硬化、肝癌等严重的肝脏疾病。联合使用聚乙二醇干扰素和利巴韦林是经典的丙肝治疗方法，但约50%的1型HCV病人对此耐药，研发丙肝的新疗法迫在眉睫，而对HCV生活周期的阐述则为抗病毒研究提供治疗的靶标。高迁移率族蛋白1（HMGB1）是一种非组蛋白核蛋白，调节染色质的结构和功能。在病毒感染宿主细胞时，HMGB1既能抑制登革热病毒和水泡性口炎病毒等病毒的复制，又能促进禽流感病毒的复制，本课题主要研究肝细胞中HMGB1对HCV生活周期的影响。我们运用siRNA和shRNA等RNA干扰手段，对肝癌细胞系Huh7、Huh7.5以及HLCZ01中的HMGB1进行基因沉默。在HCV感染Huh7.5和HLCZ01，以及NDV感染Huh7的实验中，沉默HMGB1导致细胞中的病毒含量降低，过表达HMGB1则导致HCV在HLCZ01细胞中的含量升高，同时IFNβ的表达水平与细胞中病毒含量呈正相关性，这些结果预示着肝细胞中的HMGB1能够促进病毒复制，并且不是通过影响细胞的先天免疫反应实现的。免疫荧光结果显示，HCV的感染诱导了肝细胞中的HMGB1由胞核向胞质的转移。通过免疫共沉淀和RNA结合蛋白免疫共沉淀实验证实，HMGB1不与HCV的core、NS2、NS5A等病毒蛋白结合，而与HCV的负链RNA结合。这些实验数据显示，HCV感染肝细胞后，HMGB1从胞核转移至胞质，通过结合HCV负链RNA促进HCV的复制。我们的研究对于HMGB1在病毒感染中的功能，以及HCV的生活周期有了新的阐述，为抗病毒研究提供了一种新的靶标、思路和方法。