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香蕉(Musa spp.)是世界中一种重要的水果和粮食作物。香蕉枯萎病是由古巴尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum f.sp.Cubense)引起的、制约香蕉生产的主要毁灭性病害。原菌要成功侵染寄主,首先必须越过植物细胞壁这道障碍。富羟脯氨酸糖蛋白(HRGPs)在植物细胞壁介导的抗病性中扮演重要的角色:许多研究结果都表明HRGPs参与了植物的抵抗病原菌入侵的过程。然而,HRGPs在植物抗病过程中的作用机理仍不清楚。本项目以高抗香蕉枯萎病的‘粤优抗1号’和高感品种‘巴西蕉’(Musa spp.AAA)为试材,接种香蕉枯萎病菌4号生理小种((Fusarium oxysporum f。sp.Cubense race4))后,利用PME及20种识别不同植物细胞壁HRGPs成份的单克隆抗体,采用免疫标记技术对接种病原菌前、后,细胞壁中相应抗原成份在香蕉抗、感品种中的时空分布及表达量差异进行比较分析,以揭示HRGPs在香蕉-镰刀菌互作过程中的作用机理,从而为抗枯萎病育种提供理论参考。获得的主要研究结果如下: 1.在未切根对照中,JIM11和JIM20两种抗体所识别的抗原成份分布于根的皮层细胞中,尤其是在3个细胞交联处。病原菌侵染6小时后未发现明显的信号变化,仅维管薄壁细胞和木质部中的信号消失。病原菌侵染或伤根48小时后,皮层细胞、维管薄壁细胞和木质部中两种抗体的抗原含量均表现上升。 2.在香蕉根横切面上均能检测到MAC207抗原[β-D-GlcpA-(1→3)-a-D-GalpA-(1→2)-L-Rha]成份的存在,相比之下,表皮细胞中的信号较弱。病原菌侵染导致抗体信号减弱。除了伤根48小时的情况外,抗病品种中的信号总是比感病品种中的强。 3.CCRC-M7的抗原(1-6)-β-D-galactan或是阿拉伯聚半乳糖蛋白(AGPs)也分布在香蕉根的横切面中,表皮与韧皮部中的信号相对较强。病原菌侵染也导致了抗体信号减弱。除了伤根6小时的情况外,抗病品种中的信号总是比感病品种中的强。 4.LM14的抗原成份在香蕉根系中含量较高,抗体信号在两个品种中均比较强。病原菌侵染6小时后,抗病品种中抗原含量上升而感病品种中的则表现相反的趋势。病原菌侵染6小时后,抗病品种中抗体信号微弱下降。相反地,感病品种中的信号下降较多。无论是处理后6小时还是48小时,抗病品种中的抗原含量总是比感病品种中的高。然而,两个品种的对照中抗体信号强弱无明显的差别。 5.LM2抗体在香蕉根组织中的信号也较强,但表皮、内皮层及中柱鞘除外。在6小时伤根对照中,感病品种的信号强于抗病品种的。病原菌侵染6小时后两个品种中的信号均表现增强。相反,病原菌侵染6小时后信号则表现减弱。伤根48小时后根中的信号与病原菌侵染6小时后的强度相当。除病原菌侵染48小时外,感病品种中的抗原水平总是高于抗病品种的。 6.香蕉根组织中JIM16抗体的信号非常强。抗原主要分布在根表皮及中柱鞘以内的细胞中。抗原水平不受伤根及病原菌侵染的影响,在抗、感品种间也没有区别。 7.抗体JIM8、JIM13、JIM15和PN16.484的抗原仅分布在根表皮及韧皮部。病原菌侵染未引起信号变化。但伤根或处理48小时后,根表皮信号增强,抗感品种间没有差异。 8.其它8种抗体(JIM12、JIM14、JIM17、JIM101、LM1、MAC204、MAC265和MACA266)所识别的AGPs在香蕉根组织中几乎检测不到。这表明这些抗原在香蕉中可能不存在。