【摘 要】
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背景喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)是一种高侵袭性的头颈部恶性肿瘤。研究表明,自噬是维持机体正常生理平衡和内环境稳态的重要机制,与人生长发育以及肿瘤发生等生理过程有密切关系。微小核糖核苷酸(micro RNA,miRNA)是一类参与多种细胞生理过程的内源性非编码RNA,在细胞生长、增殖、分化和凋亡中发挥着不可缺少的作用。微小RNA-124
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背景喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)是一种高侵袭性的头颈部恶性肿瘤。研究表明,自噬是维持机体正常生理平衡和内环境稳态的重要机制,与人生长发育以及肿瘤发生等生理过程有密切关系。微小核糖核苷酸(micro RNA,miRNA)是一类参与多种细胞生理过程的内源性非编码RNA,在细胞生长、增殖、分化和凋亡中发挥着不可缺少的作用。微小RNA-124(micro RNA-124,miR-124)是miRNA家族的一员,已被发现广泛参与多种恶性肿瘤的增殖、侵袭和转移,然而其在LSCC中的表达特点和作用尚未见报道。目的本研究根据miR-124和自噬蛋白LC3B-II在LSCC组织及周围的癌旁组织中的表达特点,探讨miR-124与自噬及LSCC细胞生物学功能的相关性。拟利用Hep-2细胞中检测miR-124是否可通过自噬调控LSCC增殖、侵袭和迁移,为LSCC的治疗提供新的思路。方法选取自2016年1月至2018年9月新乡医学院第一附属医院手术切除的LSCC组织及癌旁组织(距离肿瘤边缘1～2 cm)标本各12例,采用实时定量聚合酶链反应(Real-Time Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)检测LSCC组织和癌旁组织中miR-124的表达;体外将人Hep-2细胞培养至50%～60%融合度时,将细胞分为miR-124 mimics组、mimics NC组(mimics对照组),miR-124 inhibitor组、和inhibitor NC组(inhibitor对照组),进行细胞转染,采用RT-PCR检测4组人Hep-2细胞miR-124的基因水平,Western blot实验检测组织和细胞中自噬相关蛋白LC3B-II的表达特点,细胞计数试剂盒(Cell Counting Kit-8,CCK-8)方法检测人Hep-2细胞增殖能力,细胞划痕实验(Wound Healing)检测人Hep-2细胞的迁移能力,Transwell法检测人Hep-2细胞的侵袭能力。结果LSCC组织中miR-124相对表达量显著低于癌旁组织,而自噬相关蛋白LC3B-II相对表达量明显高于癌旁组织;过表达miR-124后,Hep-2细胞中LC3B-II蛋白表达明显下调;抑制miR-124表达后,Hep-2细胞中LC3B-II蛋白表达明显上调;过表达miR-124明显抑制了Hep-2细胞的增殖、侵袭和迁移能力,但加入自噬激动剂后明显恢复Hep-2细胞的增殖、侵袭和迁移能力;抑制miR-124表达明显促进Hep-2细胞的增殖、侵袭和迁移能力,当加入自噬抑制剂后明显削弱了Hep-2细胞的增殖、侵袭和迁移能力。结论miR-124在LSCC中可能发挥抑癌功能,miR-124可能通过抑制自噬从而抑制LSCC细胞的增殖、侵袭和迁移能力。
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