坐骨神经化学去细胞方法和组织形态学察

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目的以前的同种异体神经化学去细胞的方法,都是围绕着大鼠,兔,狗等动物进行的,本实验方法根据以前及现有文献,选择猪的坐骨神经作为研究对象,通过不同的试验方法,选用不同的试剂,对猪的坐骨神经进行化学去细胞,研究对粗大神经进行化学去细胞,评价比较不同方法去细胞程度,进而选择出更好的适用于粗大神经的化学去细胞方法。方法取新鲜猪的坐骨神经,去除坐骨神经外膜上的筋膜脂肪组织,共取30段,每段长约60毫米,直径约为4毫米,按化学去细胞方法不同分为3组:Sondell法组(10根)、化学去垢剂-酶消化法组(10根)和对照组(10根),分别用Sondell法和酶消化法进行化学去细胞处理。Ⅰ组:Sondell法组:Triton-100,脱氧胆酸钠进行化学去细胞2次。Ⅱ组:化学去垢剂-酶消化法组:十二烷基硫酸SDS,乙二胺四乙酸EDTA、RNA酶I和DNA酶I进行化学去细胞48小时。对照组:新鲜未处理的猪坐骨神经。从异体神经去细胞后的神经管道完整性保存,细胞和髓鞘的去除程度等方面进行评价。结果实验两组神经段的神经纤维管道保存尚可,Ⅱ组较Ⅰ组化学去细胞完全,laminin成分保存较Ⅰ组多,对异体神经结构破坏的较小,Ⅰ组和Ⅱ组的神经管道的完整性要比正常神经管道的完整性差,因此,在去细胞异体神经的制备过程中,应考laminin成分保存程度,去细胞的程度和异体神经结构完整性。结论1、综合运用在对猪的坐骨神经进行化学去细胞的方法的探讨中,发现对于粗大神经的化学去细胞,选用化学去垢剂-酶消化法可能成为一种较为理想的异体神经制备的方法,用此种方法制备出的异体神经,更好的保存了神经的结构保存,免疫抗原物清除的比较彻底,显示出良好的发展前景。2、化学去细胞后的异体神经,能够明显的促进神经的趋化性再生。3、化学去细胞后异体神经,是神经移植的一种较为理想的移植替代物,在修复大段神经缺损中发挥了支架、支撑的作用,而且异体神经还具备人工材料所没有的、即趋化性再生作用,随着技术的发展,预计将有可能替代自体神经移植。
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