【摘 要】
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目的:探讨TGF-β-ALK-Smad信号通路在高氧诱导肺血管内皮细胞中的变化,为支气管肺发育不良的肺血管发育受阻机制的新认识提供实验依据。方法:将人肺微血管内皮细胞（HPMECs）随机分成两组,高氧组和对照组。高氧组在5%CO2+60%O2+35%N2混合气体的37℃多气体培养箱中进行培养,而对照组则在5%CO2、37℃温度条件培养箱中进行培养。分别于实验开始点、3h、6h、9h、12h、24h
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目的:探讨TGF-β-ALK-Smad信号通路在高氧诱导肺血管内皮细胞中的变化,为支气管肺发育不良的肺血管发育受阻机制的新认识提供实验依据。方法:将人肺微血管内皮细胞（HPMECs）随机分成两组,高氧组和对照组。高氧组在5%CO2+60%O2+35%N2混合气体的37℃多气体培养箱中进行培养,而对照组则在5%CO2、37℃温度条件培养箱中进行培养。分别于实验开始点、3h、6h、9h、12h、24h和48h,进行高氧组与对照组的血管生成过程的形态学观察且比较两组间小管的总长度。采用蛋白免疫印迹技术,在实验开始、6h、12h、24h分别测定TGF-β1、ALK1、ALK5,P-Smad1/5、P-Smad2/3的蛋白含量。结果:1.对照组肺血管内皮细胞在基质胶上生长3h时开始形成管状结构,小管形成的峰值发生在12h到24h之间,在24h可形成典型条索状结构,管腔明显,结构完整,发出多个分支,分支清晰,并闭合成管状,在48h开始恶化。高氧组的小管生成能力随氧暴露时间的延长而被抑制。与对照组比较,24h高氧组的小管生成总长度显著降低（P＜0.05）。2.在24h高氧组的TGF-β1蛋白表达明显高于对照组（P＜0.01）;高氧组ALK1和P-Smad1/5在不同时间点的表达均低于对照组,但无统计学差异（P＞0.05）;而高氧组ALK5和P-Smad2/3在24h时表达明显高于对照组（P＜0.01）。结论:1.高氧环境可显著抑制肺血管内皮细胞血管生成能力。2.高氧环境改变肺血管内皮细胞TGF-β-ALK1-Smad1/5和TGF-β-ALK5-Smad2/3信号通路之间平衡,影响血管生成。3.推测高氧环境主要通过促进TGF-β-ALK5-Smad2/3信号通路而抑制肺血管内皮细胞的血管生成能力。
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