20-羟二十烷四烯酸在肺高血压大鼠中含量变化及其对肺动脉平滑肌细胞增殖的作用

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目的:探究肺高血压中20-羟二十烷四烯酸(20-Hydroxyeicosatetraenoic acid,20-HETE)的含量变化,20-HETE对肺动脉平滑肌细胞增殖的影响及其机制研究。方法:20只8周龄雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠分为对照组和肺高血压组,肺高血压组用野百合碱40mg/kg,分两次隔周腹腔注射,对照组以相同剂量生理盐水注射,4周后检测肺动脉压力和右心室肥厚指数,肺组织切片HE染色观察其形态学变化,WA%和WT%反映肺血管重构以验证肺高血压模型的成功建立。收集血清、肺组织和分离培养的肺动脉平滑肌细胞上清液,进行液相色谱质谱联用检测不同样品中20-HETE含量,通过内标20-HETE-d6监测样品回收率。取正常雄性SD大鼠分离培养其肺动脉平滑肌细胞,分别进行常氧、缺氧、缺氧+HET0016、常氧+20-HETE干预(HET0016为20-HETE的特异性合成抑制剂)。Ed U试剂盒检测细胞增殖水平,ROS试剂盒检测其ROS生成水平。统计学方法选用t检验或单因素方差分析。结果:(1)肺高血压组肺动脉压力和右心肥厚指数明显高于对照组,肺组织切片HE染色显示肺高血压组中WA%和WT%水平明显高于对照组;(2)肺高血压组中血清和肺组织20-HETE含量明显升高;(3)缺氧上调肺动脉平滑肌细胞20-HETE水平;(4)20-HETE促进肺动脉平滑肌细胞的增殖,HET0016可抑制缺氧条件下的肺动脉平滑肌细胞过度增殖现象;(5)20-HETE使细胞ROS水平升高,HET0016可抑制缺氧条件下的ROS生成水平;结论:肺高血压大鼠中肺血管重构伴随著20-HETE水平升高,而20-HETE对肺动脉平滑肌细胞的促增殖作用可能与其促进ROS表达有关。
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