蒲公英花中黄酮类化合物的分离提取及其生物效应研究

来源 :山西医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:r57014848
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本文旨在确定蒲公英花中总黄酮的最佳提取和纯化工艺,分离得到蒲公英花中的黄酮类化学成分,并对其中一些成分进行含量测定;初步探讨蒲公英花提取物的抗氧化、抗肿瘤以及抑菌活性。主要内容如下:   1.采用超声波提取技术,考察乙醇浓度、料液比、超声功率、温度等因素对蒲公英花中总黄酮及总酚酸提取率的影响。结果表明,用75%乙醇,料液比1∶100,超声功率100W,在55℃的条件下超声提取30min所得总黄酮与总酚酸的含量最高。该工艺操作简便,提取效率高,重现性好,并在供试质量浓度范围内呈现量效关系。   2.采用邻苯三酚自氧化法和邻二氮菲-二价铁氧化法分别测定蒲公英花提取液对超氧阴离子自由基和羟自由基的半数抑制率IC50为96.1μg·mL-1和7.7μg·mL-1;蒲公英花提取液可使花生油的过氧化值(POV)显著降低,其效果与0.10%的维生素C相当。提取液对超氧阴离子自由基、羟自由基和油脂自氧化均有较好的清除效果。   3.采用单因素法考察大孔吸附树脂纯化提取物的最佳工艺,对上样溶液浓度、pH、洗脱剂浓度和流速等进行考察,并将其与有机溶剂萃取法进行对比。结果表明,树脂法纯化蒲公英花中总黄酮的最佳纯化工艺参数为:在D-101型大孔吸附树脂柱中,上样溶液浓度为1.238mg·mL-1(pH=3.0),室温下以流速2.0BV·h-1吸附饱和,依次用4BV水、20%、50%、70%乙醇溶液以2BV·h-1的流速洗脱,收集50%、70%乙醇洗脱液,测得黄酮纯度为92.56%,吸附率为80.65%,解吸率为53.44%,回收率为42.75%。有机溶剂萃取法结果表明石油醚相中黄酮纯度为41.9%,回收率为34.9%;乙酸乙酯相中黄酮纯度为92.4%,回收率为40.5%。   4.采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度蒲公英提取物对肝癌细胞系HepG2增殖的抑制作用,结果表明,随着蒲公英提取物作用浓度的增加(0.3~1.5mg·mL-1)、作用时间(24、48和72h)的延长,其HepG2对细胞增殖的抑制作用逐渐增强。三个作用时间点的最大抑制率分别达71.9%、81.3%及89.5%,其IC50分别为0.860、0.583及0.404mg·mL-1。   5.将蒲公英花的乙酸乙酯相提取液与肉汤稀释液配成不同浓度的供试液,测定其最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果表明,其对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、变形杆菌和绿脓杆菌敏感:对大肠埃希菌低度敏感。   6.采用聚酰胺和硅胶层析柱对总黄酮类化合物进行分离得到单体,经核磁氢谱、碳谱和质谱解析确定结构,并采用HPLC法测定各个提取物中木犀草素的含量。从蒲公英花中分离得到4个化合物,结构鉴定其中2个(1-2)分别是木犀草素、金圣草素。并首次建立了蒲公英花中木犀草素含量测定的HPLC法,色谱条件为:色谱柱ZORBAXEclipseXBD-C18(5μm,250×4.6mm),流动相为甲醇:水:醋酸=60∶39∶1,检测波长350nm,线性范围为1.0~5.Oμg·mL-1(r=0.9999),回收率为99.18%(RSD=2.94%)。该方法简便、准确、重现性好,可作为评价蒲公英花质量的指标。
其他文献
人物档案李泉新,1958年2月出生于江西丰城,1985年8月加入中国共产党。1989年5月调入江西省纪委,曾任江西省纪委常委、省监察厅副厅长,2014年1月任江西省委第三巡视组组长。中
经济烟草行业落实科学发展观的理论与现实思考…………吕忠信(1)3烟草企业法人治理结构研究……………………………吴践志(2)3烟叶生产可持续发展的理性思考……………………
[目的]   选取自发性感染结核的恒河猴作为研究对象,通过结核菌素皮下试验(Tuberculin Skin Test,TST)初步诊断、组织病理检查确诊为结核感染后,进一步检测脑部β淀粉样蛋白(
为了控制全息光栅光刻胶掩模槽形,运用曝光模型和显影模型模拟了掩模的槽形形成过程和变化规律.实验对比了不同曝光量,不同显影浓度,不同空频条件下的掩模槽形,特别是占宽比(
2月27日,全省新闻舆论工作座谈会在西宁召开,省委书记骆惠宁出席并讲话。他强调,要深入学习贯彻习近平总书记2月19日在党的新闻舆论工作座谈会上的重要讲话精神,紧密联系实际
置入式广告(Product Placement),又称植入式广告,是指将产品或其代表性的视觉符号、品牌工具甚至服务内容策略性地融入媒介,以达到传达产品或服务信息的目的。置入式广告最早
目的:利用分子生物学技术,干扰Aha1的正常表达,分析干预前后斑马鱼运动能力、肌小节组分蛋白、肌球蛋白分子伴侣热激蛋白90(Hsp90α)和Unc45b的变化,探寻Aha1对肌小节组装的
西双版纳供电局党委下设3个党总支、15个党支部,共412名党员,占全局员工人数的30%。长期以来,西双版纳供电局党委致力于开展学习型党组织建设,助力企业创先发展。经过借鉴学
同报纸、广播新闻评论相比,电视新闻评论起步较晚,其运作方式、步骤、手段等尚处在探索和发展之中,难免存在一些弊端,这在市(地)县级电视台的节目中表现尤为突出,有待进一步
目的:通过繁育和筛选纯合子HLA-Cw*0602转基因鼠,研究其遗传状况并确定其遗传稳定性。使用咪喹莫特诱导转基因鼠出现银屑病样皮肤变化,检测相关生物学指标,初步分析其可能的原因