高渗盐水对高压环境下BV2小胶质细胞表达TNF--α和 TNF--α、IL--1β的影响

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背景颅内压增高是急诊科、重症监护病区的常见急危重症之一,如未能及时有效救治就可出现脑疝,进而危及生命。研究表明,在颅内压升高的环境下,小胶质细胞激活并同时发挥神经损害与神经保护的双重作用,参与对颅内环境稳态的调节。而作为治疗颅内高压的常用药物,高渗盐水被证明可以减缓一些颅内疾病如脑梗死后小胶质细胞炎症反应。高压力能否对BV2小胶质细胞促炎症因子TNF-α和IL-1β的表达产生影响,高渗盐水能否抑制高压刺激小胶质细胞TNF-α和IL-1β表达,尚待研究。
  目的
  1.探究高压力对BV2小胶质细胞促炎症因子TNF-α和IL-1β表达的影响;
  2.探究高渗盐水对高压刺激下小胶质细胞促炎症因子TNF-α和IL-1β表达的影响。
  方法本研究使用自制加压装置干预体外培养的BV2小胶质细胞,根据干预压力随机分为对照组、20mmHg组、25mmHg组、30mmHg组、35mmHg组共5组。确定干预压力值后,根据干预时间随机分为:对照组、6h组、12h组、24h组共4组,使用WesternBlot法、免疫荧光双标法检测各组TNF-α和IL-1β的表达情况;依照确定好的干预压力值及时间,根据干预条件随机将细胞分为对照组、压力组、压力+高渗盐水组、压力+生理盐水组共4组,使用WesternBlot法、免疫荧光双标法检测各组TNF-α和IL-1β的表达情况。
  结果体外细胞实验研究表明:30mmHg的压力处理小胶质细胞24h后,TNF-α和IL-1β的表达水平明显高于对照组(TNF-α:P<0.01;IL-1β:P<0.01)、6h(TNF-α:P<0.01;IL-1β:P<0.01)、12h组(TNF-α:P<0.05;IL-1β:P<0.01);30mmHg压力组TNF-α、IL-1β的表达水平明显高于对照组(均P<0.01)、20mmHg组(TNF-α:P<0.01;IL-1β:P<0.01)、25mmHg组(TNF-α:P<0.05;IL-1β:P<0.01)。30mmHg组与35mmHg组比较,TNF-α和IL-1β的表达差异无统计学意义(TNF-α:P>0.05;IL-1β:P>0.05)。压力组小胶质细胞TNF-α、IL-1β表达水平明显高于对照组(均P<0.01);与压力组对相,压力+高渗盐水组TNF-α、IL-1β表达水平明显降低(均P<0.01)。压力+高渗盐水组与压力+生理盐水组相比,TNF-α、IL-1β表达显著降低(均P<0.01)。压力+生理盐水组与压力组相比,TNF-α、IL-1β水平无统计学差异(TNF-α:P=0.407;IL-1β:P=0.203)。结论1.高压力可明显升高BV2小胶质细胞TNF-α和IL-1β的表达;
  2.高渗盐水可以抑制高压环境下BV2小胶质细胞炎症因子TNF-α、IL-1β的表达,从而减轻BV2小胶质细胞的炎症反应。
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