论文部分内容阅读
一、滇桂艾纳香指纹图谱研究
目的:建立滇桂艾纳香的高效液相色谱指纹图谱,得到参照图谱,为科学评价和有效鉴别滇桂艾纳香药材与控制其质量提供新方法。
方法:对比不同提取溶剂、不同提取方法所获得的指纹图谱,选择图谱显示化学成分较多,提取率较高的方法作为提取条件。本文选用合适的色谱柱及检测波长,优选流动相的组成、配比、流速,调节柱温,使色谱符合指纹图谱的要求。在已确定的色谱条件下,考察指纹图谱中绿原酸的分离度和理论塔板数。取同一份样品溶液,重复进样6次,记录保留时间和峰面积作精密度试验。取样品溶液分别于0、2、4、8、12、24小时进样,记录保留时间和峰面积作稳定性试验。取同一批滇桂艾纳香药材6份,平行制备样品溶夜,进样,记录保留时间和峰面积作重复性试验。选择不同产地的滇桂艾纳香药材10批,制备供试品溶液,进行指纹图谱分析。使用“计算机辅助相似度评价软件”进行数据处理,对10批滇桂艾纳香药材进行相似度比较分析。
结果:样品提取方法,以药材水煎煮后,用稀盐酸调PH=3后,再用乙酸乙酯∶乙醇(4∶1)混合溶液萃取四次为佳,其所得图谱峰信息较多,保留时间有较好的稳定性与重现性.色谱条件以安捷伦Agilent ZOBAX SB C18(0)DS柱(4.6*150mm,5μm),甲醇-0.05%磷酸为流动相进行梯度洗脱;流速为1.0ml/min,柱温30℃;检测波长为220nm,进样量20μl。在上述色谱条件下,绿原酸的保留时间约为23分钟,与其它色谱峰的分离度大于1.5。精密度试验显示,占5%以上的各共有色谱峰相对保留时间和相对峰面积均无明显变化,其RSD值分别为0.0034%~0.0275%之间和0.0484%~0.1943%之间,精密度良好。稳定性试验显示,占5%以上的各共有色谱峰相对保留时间和相对峰面积在24小时内均无明显变化,其RSD值分别为在0.0169%~0.0723之间和0.2240%~1.2991%之间,显示其稳定性良好。重复性试验显示,占5%以上的各共有色谱峰相对保留时间和相对峰面积均无明显变化,其RSD值分别为0.0141%~0.1638%之间和0.9794%~4.5035%之间,重复性良好。得到10批滇桂艾纳香药材的指纹图谱,并生成对照图谱。10批滇桂艾纳香药材指纹图谱相似度较好,以相似度计算,各批药材间的相似度比较,均在0.8以上,各批药材与对照指纹图谱间的相似度均在0.9以上。
结论:本文建立了滇桂艾纳香药材的HPLC指纹图谱,并得到对照指纹图谱,其检测方法重现性和精密度良好,可用于滇桂艾纳香药材的鉴别,并有助于其GAP规范种植与质量控制。
二、滇桂艾纳香原儿茶酸和绿原酸含量测定
目的:建立以原儿茶酸和绿原酸为评价指标的滇桂艾纳香含量测定方法。测定不同产地的滇桂艾纳香药材中原儿茶酸和绿原酸的含量,找出滇桂艾纳香的最佳产地,为建立GAP种植基地提供实验依据。
方法:选定同一批号的滇桂艾纳香药材,采用高效液相色谱法,在C18(0)DS柱进行分离测定原儿茶酸和绿原酸。流动相甲醇-0.05%磷酸梯度洗脱,流速为1ml/min,检测波长设置为258nm/327nm转换波长,柱温30℃。
结果:10批滇桂艾纳香中原儿茶酸的含量分为0.0279mg/g、0.0193mg/g、0.0240mg/g、0.0134mg/g、0.0135mg/g、0.0453 mg/g、0.0279mg/g、0.0235 mg/g、0.0343 mg/g、0.0347mg/g,其中以6号百色德堡产地的药材含量最高。10批滇桂艾纳香中绿原酸的含量分为0.3001mg/g、0.8076 mg/g、0.7030mg/g、0.3461mg/g、0.1933mg/g、0.8647mg/g、0.3897mg/g、0.2109mg/g、0.3979mg/g、0.5201mg/g,其中以6号广西百色市德堡县产地的药材含量最高。
结论:所建立的高效液相含量测定方法灵敏度高,专属性强,重现性好,能准确、快速地进行含量测定,以原儿茶酸和绿原酸为含量标准,滇桂艾纳香的最佳产地是广西百色市德堡县。