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本论文从药用植物中分离内生菌,进行了植物样本表面消毒、内生菌分离纯化、抗菌活性菌株筛选、活性菌株鉴定以及其摇瓶发酵条件优化等研究,为寻找天然抗菌物质提供资源。获得的主要结果如下:1、植物内生菌的分离纯化从3种药用植物样本中分离得到8株内生菌(丝状真菌5株,细菌2株,放线菌1株),但有3株(2株丝状真菌,1株放线菌)不能在体外培养。2、抗菌活性植物内生菌的筛选内生菌发酵液经离心取上清液,进行抑菌试验。在本实验条件下,小叶榕内生细菌EF-B01菌株发酵处理液对铜绿假单胞菌和大肠杆菌有很强的抑制作用,其中对铜绿假单胞菌的抑菌圈直径达23.28mm,对金黄色葡萄球菌有较弱的抑制作用。EF-B01菌株发酵处理液对黑曲霉菌丝的生长有很强的抑制作用,培养5天,抑制率达82.3%,且EF-B01菌株发酵处理液能强烈抑制黑曲霉孢子的形成。3、抗菌活性内生菌EF-B01菌株的鉴定对抗菌能力较强的内生细菌EF-B01菌株进行了培养特征、形态观察、部分生理生化特性鉴别以及16S rDNA测序,综合鉴定该菌株为枯草芽孢杆菌(B. subtilis),将其命名为Bacillus subtilis EF-B01。4、抗菌活性内生菌EF-B01菌株发酵条件的优化为了增加发酵液中生物量和抗菌活性物质的量,对内生细菌B. subtilis EF-B01菌株进行了最适碳源和氮源、初始pH值、装液量、发酵接种量、摇床转速和培养温度的研究。结果表明,通过单因子试验得到的最适的碳源、氮源及其含量分别为3%玉米粉、4%豆饼粉,初始pH值8.0,装液量30%,发酵接种量1%,摇床转速160rpm,培养温度34℃。在最优发酵条件下,内生细菌B. subtilis EF-B01菌株培养48h后发酵液的OD值为7.95,比优化前的5.23提高了52.0%。培养72h后,发酵液对铜绿假单胞菌的抑菌圈直径达26.42 mm,比活性菌株初筛时的23.28mm提高了13.5%。