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木霉菌(Trichoderma Pers.:Fr.)是一类普遍存在于土壤中的真菌,其有性型属于肉座菌属(Hypocrea Fr.)。一些木霉菌是重要的生防菌,已广泛运用于土传病害的防治。辣椒疫病(Pepper blight)是典型的土传病害,病原菌是辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici),病原菌生长繁殖主要发生在低、中温范围。病害发生温度范围为16-32℃,其游动孢子囊萌发和释放的温度范围为16-26C。针对病原菌生物学特性,选择适宜低温条件下生长的生防菌,能更有效的防治辣椒疫霉菌。而一般用于防治辣椒疫病的生防菌为常温条件下的木霉菌。为此,从不同常年低温的山顶地区采集和分离的木霉菌,进行多样性资源进的调查研究,同时利于获得的木霉菌株用于筛选对辣椒疫霉菌的有拮抗作用的木霉菌。
对中国湖南张家界、山东泰山和陕西太白山山顶地区的木霉菌种类进行了研究,明确温度、海拔和植被对木霉种类分布的影响。采集共36份土样,分离出248株木霉菌株,同时,筛选处理拮抗辣椒疫霉菌的生防菌株。真菌鉴定采用形态学和分子系统学相结合的方法。形态学观察是不同培养基上进行的。在CMD培养基上培养的木霉菌主要用于观察分生孢子、分生孢子梗和产孢瓶梗; PDA和CMD培养基用于观察菌落特征,培养条件都是在20℃光暗交替条件下培养的。分子系统学是依据ITS和Tef1序列进行的。形态学和系统学结合鉴定的结果显示,来自张家界的91株木霉菌株,具有9个种,分别为(T.atroviride,T.koningii,T.longipile,T.asperellum,T.koningiopsis,T.hamatum,T.harzianum,T.cerinum,T.viride);太白山共分离获得75株木霉菌株,仅3个种(T.viridescens,T.oblongisporum,T.polysporum);泰山共分离获得82株木霉菌株,共6个种(T.konigii,T.koningiopsis,T.atroviride,T.hamatum,T.cerinum,T.viride)。另外,有4个分离系待鉴定。
通过研究木霉菌对辣椒疫病的拮抗作用,及其代谢物对其抑制作用,结果显示,筛选出拮抗效果好的菌株23株(拮抗效果为1),其中来自张家界有9株[T.atroviride(TZ0108,TZ0305,TZ0602,TZ0603,TZ0210),T.asperellum(TZ0103),T.harzianum(TZ0402,TZ0403), T.viridescens(TZ0604)];泰山有7株[T.viridescens(TT0501,TT0506,TT0803,TT0805),T.konigiopsis(TT0302,TT0402,TT1001)];太白山有7株,分别为[T.viridescens(TS0606,TS0904,TS1105,TS0606,TS0904),T.oblongisporum(TS1201,TS1203)]。筛选出产生活性代谢物完全抑制辣椒疫霉生长的共33个菌株,其中张家界有13株,分别为T.atroviride(TZ0209,TZ0702, TZ0704, TZ0710, TZ1102, TZ1106, TZ1107, TZ1202, TZ1205, TZ0210),T.viridescens(TZ1003,TZ1005,TZ1204);泰山有7株,分别为T.viridescens(TT0501,TT0508,TT0604, TT0606, TT0906),T.hamatum(TT0108,TT0401),太白山有13株,分别为T.viridescens(TS0102,TS0207,TS0404,TS0405,TS0504,TS0602, TS0603, TS0910, TS0911, TS1103, TS0606, TS0904), T.polysporum(TS1106)。比较木霉菌的拮抗作用和抑制作用,拥有两个拮抗机制的菌株4个。分别是T.atroviride(TZ0201,来自张家界),T.viridescens(TS0606和TS0904来自太白山;TT0501来自泰山)。