论文部分内容阅读
生物等效性(Bioequivalence,BE)是为了验证两个不同的制药公司生产的药物,其所含的活性成分相同,或者是相同产品的两种不同制剂,它们在临床上使用时以相同的速度与程度被吸收进入动物体内,表现出相似的生物利用度和相同的药效,那么这两种产品在临床上就可以互相替代。土霉素(Oxytertracycline,OTC)属于天然的四环素类抗生素,在动物体内的药物动力学特征良好,残留在体内的药量低,毒副作用较小,是一种较好的广谱抗菌药物。本试验旨在研究两种20%长效土霉素注射液在猪体内的生物等效性。目的：建立土霉素在猪血浆中的提取和高效液相色谱(HPLC)检测方法；探讨土霉素在猪体内的吸收、分布和消除规律；研究两种长效土霉素注射液在猪体内的生物等效性,为兽医临床安全使用该药提供科学的依据。方法：本试验通过采用2x2两周期交叉试验设计,将24头健康长白猪(30±5)kg随机分成2组,分别单剂量肌内注射国产20%长效土霉素注射液和美国辉瑞制药有限公司20%长效土霉素注射液,给药剂量(以土霉素计)均为20mg/kg体重,两次给药时间相隔14d,根据试验之前设定好的时间点进行采血。通过液-液萃取的方法使用10%高氯酸提取药物,然后用微型漩涡混合仪混悬60s,以14OOOr/min高速离心后取上清液,采用HPLC检测猪血浆中药物的浓度。应用3P97药动学软件分析数据得出主要药动学参数AUC0-144、AUC0-∞、 Cmax及Tmax。以多因素方差分析对AUC0-144、AUC0-∞和Cmax进行显著性检验,然后再进行双向单侧t检验和90%置信区间法检测,分析其生物等效性。对Tmax采用的是非参数的方法进行等效性分析。结果：成功建立猪血浆中土霉素的提取和高效液相色谱(HPLC)测定方法；所建立的检测方法相关性及线性关系均良好,相关系数(r)为0.9999,土霉素在血浆中的最低检出浓度为0.025μg/mL,最低定量浓度为0.05μg/mL；土霉素在血浆中的回收率达到85%以上；日内变异系数与日间变异系数分别在5%和10%以内,符合试验要求。受试组和参比组肌内注射20%长效土霉素注射液(以土霉素计20mg/kg)之后,在猪体内的药动学过程均表现为有吸收二室开放模型,主要药动学参数均值分别为：AUCo-144为(118.926±13.259)μg·h/mL和(126.179±17.390)μg·h/mL, AUC0-∞为(123.087±13.906)μg·h/mL和(130.732±18.562)μg·h/mL, Cmax为(5.066±0.486)μg/mL和(5.071±0.877)μg/mL, Tmax为(0.740±0.278h)和(0.650±0.258)h。受试品的相对生物利用度F为(94.291±15.287)%。生物等效性检验结果显示,参数AUC0-144、AUC0-∞与Cmax经多因素方差分析,每个参数在产品间、周期间以及个体间的差异不显著(P>0.05)；经过双向单侧t检验,其统计量t1与t2均有显著的差异(p<0.05)；受试产品AUCo-14490%置信区间为99.8%～100.7%, AUC0-∞90%置信区间为92.0%-102.1%,均介于参比产品80%-125%之间；受试产品Cmax90%置信区间为91.9%-107.2%,介于参比产品70%-143%之间。Tmax经过非参数方法检验之后,显示两组数据之间无显著性差异。综上所述,本课题确定了土霉素在猪血浆中的提取和高效液相色谱检测方法,阐明了两种产品在猪体内药物动力学过程的相似性,经统计学表明：国产20%长效土霉素注射液和美国辉瑞20%长效土霉素注射液在猪体内具有生物等效性。