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目前，对于终末期器官衰竭最有效、最直接的治疗手段就是器官移植。虽然现在临床上广泛应用的免疫抑制剂及免疫耐受诱导制剂已经在很大程度上降低了移植物排斥反应的发生率，但移植物的各种类型排斥反应仍然严重影响了移植物的长期存活。因此，通过某种手段如何诱导及维持器官移植免疫耐受，仍然是器官移植临床及基础研究领域所关注的热点。调节性T细胞（Tregs）是一类特殊的T细胞亚群，因其在建立和维持自身内环境的稳定，以及建立和诱导外周免疫耐受中作用而备受关注。CD47（整合素相关蛋白，IAP）是表达于多种细胞表面的跨膜糖蛋白，造血细胞表面的CD47是作为“自己”标志存在的。特别是在免疫耐受领域的研究中发现，使用表达CD47的供体来源DST可以诱导出持久的抗原特异性免疫耐受，但此过程中Tregs究竟扮演何种角色，及其在免疫免疫耐受中的具体作用机制仍存在较大的争论。实验目的：（1）MHC-I错配的小鼠皮肤心脏联合移植模型的建立；（2）研究在Tregs在DST诱导MHC-I错配的小鼠皮肤心脏联合移植免疫耐受过程中的作用及意义。实验方法：（1）建立DST诱导MHC-I错配的小鼠皮肤心脏联合移植免疫耐受模型；（2）利用MHC-I错配的小鼠皮肤心脏联合移植模型，以DST诱导皮肤及心脏移植物免疫耐受为手段，研究MHC-I错配条件下，淋巴组织及移植物内Tregs分布、数量、比例及功能的变化；实验结果：（1）单纯MHC-I错配的小鼠心脏移植物可以在受鼠体内长期存活，但MHC-I错配的小鼠皮肤移植物可以被受鼠快速排斥（MST=15天），而MHC-I错配的小鼠皮肤移植物可以诱发同源的心脏移植物出现排斥（MST=16.5天）；在MHC-I错配的小鼠皮肤心脏联合移植模型中，与单纯皮肤组比较，皮肤心脏联合移植组的皮肤移植物存活时间明显延长（MST=16.5天，p<0.05）。（2）在DST诱导MHC-I错配的小鼠皮肤心脏联合移植模型中，与对照组比较（Non-DST组，MST=17.5天），CD47+/+DST可以显著延长WTB6皮肤移植物存活时间（MST=46.5天，p<0.001），CD47-/-DST组皮肤移植物存活时间略有延长，但差别没有显著性（MST=20天），与对照组比较（Non-DST组，MST=15.5天），，CD47+/+DST可以显著延长WTB6心脏移植物存活时间（MST=42.5天，p<0.001）；CD47-/-DST组心脏移植物存活时间变化不大（MST=17天）；CD47-/-DST后，受鼠DCs快速上调了其活性标志物CD86、I-Ab，且受体脾细胞中CD86+和I-AdhiCD11c+DC的百分比增加更为显著，而CD47+/+DST后，受鼠DCs的活性标志物CD86、I-Ab变化不大；CD47-/-DST后排斥的心脏移植物内可见大量的炎细胞及Tregs浸润，炎症重的部位Tregs浸润多，而CD47+/+DST后耐受的心脏移植物中，未见明显的炎细胞及Tregs浸润；CD47-/-DST组术后18天脾脏及淋巴结中Tregs数量增加明显，但Tregs比例显著减低，而CD47+/+DST组术后18天脾脏中Tregs数量变化不大，淋巴结中Tregs数量显著增加，且脾脏及淋巴结中Tregs的比例显著升高。（3）在DST诱导MHC-I错配的小鼠皮肤心脏联合移植模型中，移植术后7天及14天2个时间点，CD47-/-DST组抗原特异性T细胞反应明显增加，CD47+/+DST受体的T细胞没有抗原特异性T细胞反应，但两组对于三方抗原的T细胞反应没有差别，Tregs抑制实验表明不同DST组Tregs的抑制功能没有显著差别。实验结论：（1）MHC-I错配的情况下，心脏移植物可以长期存活，而皮肤移植物发生排斥，皮肤移植物可以诱发心脏移植物发生排斥，而且移植物体积的大小也影响了移植物发生排斥的速度。（2）MHC-I错配的小鼠皮肤心脏联合移植模型中，表达CD47的DST细胞可以通过抗原特异性输注的方式诱导皮肤及心脏两种不同的移植物产生抗原特异性免疫耐受，而缺乏CD47表达的供体造血细胞则不能诱导出有效的免疫耐受，表达CD47的DST可以抑制DCs的成熟，相反，DCs可以被激活。（3）排斥反应发生时，移植物中效应性T细胞与Tregs的大量浸润存在平行关系，排斥小鼠淋巴器官中Tregs数量显著增加，比例显著降低；而耐受小鼠淋巴器官中Tregs数量明显增加，但比例提高更为显著，表达CD47的DST可以诱导耐受受鼠T细胞对于供体抗原的无反应性，DST后Tregs的抑制功能无明显变化。实验意义：本实验从另一个角度，全面阐述了Tregs在移植免疫耐受中的作用，进一步提高了人们对于这种特殊的T细胞亚群的认识，为临床器官移植免疫耐受诱导方案的制定提供了新的思路。