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目的：众所周知,Notch-1信号转导途径在小鼠胚胎发育过程中起着至关重要的作用。研究表明ADAM10在胚胎时期对Notch-1信号途径的活化是不可或缺的。但是,ADAM10对成年小鼠Notch-1信号转导途径的调节作用以及在神经细胞中的功能尚不清楚。为此,我们利用已建立的成年神经细胞特异性条件性ADAM10基因敲除小鼠(ADAM10cKO),研究了成年小鼠ADAM10基因缺失对Notch-1受体的加工以及对神经细胞分化和增殖的影响。 方法：首先,利用westernblotting技术检测4月龄ADAM10cKO小鼠(n=5)和ADAM10loxp/loxp小鼠(n=5)海马组织和大脑皮层中Notch-1受体S2位点裂解蛋白片段和Notch-1的胞内活性片段(NICD)的含量;然后通过荧光定量PCR技术检测4月龄ADAM10cKO(n=4)和ADAM10loxp/loxp小鼠(n=4)海马组织和大脑皮层中Notch-1的下游靶基因Hes1,Hes5,Hey1和Hey2的转录水平;再通过免疫组织化学技术分析检测5月龄ADAM10cKO小鼠(n=6)与ADAM10loxp/loxp小鼠(n=6)神经前体细胞的增殖和分化。 结果：Westernblotting实验结果表明,ADAM10cKO小鼠海马组织的Notch-1受体S2位点裂解片段和Notch-1胞内活性片段(NICD)与对照组小鼠相比,分别降低88.88％和71.36%;其大脑皮层Notch-1受体S2位点裂解片段与对照组小鼠相比降低73.86%,但是NICD未发现明显变化,并且大脑皮层和海马组织的Notch-1受体S1裂解片段未出现明显的蓄积现象。随后的荧光定量PCR实验显示,ADAM10cKO小鼠海马组织的Notch-1下游靶基因hes1,hes5,hey1和hey2,均出现不同程度的下调,其基因表达分别降低56.6%,55.5%,39.3%和43.5%。免疫组化实验结果表明,ADAM10cKO小鼠海马齿状回中分化的神经细胞数目增多以及海马齿状回亚颗粒区中未分化的神经细胞数目减少。 结论：以上实验结果表明,成年小鼠神经细胞ADAM10基因缺失明显地影响了Notch-1信号转导途径以及神经前体细胞的增殖和分化。在ADAM10cKO小鼠海马中Notch-1信号转导的活化受阻,信号通路受到影响,并且Notch-1信号通路的侧面抑制作用也受到影响,神经前体细胞分化增多,继而导致神经干细胞池中未分化的神经细胞数目减少。因此,我们认为ADAM10在成年小鼠大脑中对Notch-1信号途径的活化起着重要的调节作用并且影响成年神经细胞的稳态维持。