PHA-腺病毒微球复合物的制备与胰腺毛细血管的高效基因转移

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心血管疾病是目前全世界范围内致死和致残的主要疾病,因而基因治疗心血管疾病受到了广泛的关注。但是目前特异性地针对血管内皮细胞的基因转移方法并未成功建立。本实验室的前期研究通过腹腔干灌注腺病毒载体,实现了小鼠胰岛细胞的特异性标记。虽然病毒颗粒在血管中停留了约30分钟,然而,没有一个血管内皮细胞被感染。在本研究中,我们建立了一种可以使腺病毒载体有效感染毛细血管内皮细胞的方法。首先,制备一种同毛细血管管径大小相似的生物聚酯材料PHBHHx微米颗粒(5~10μm)。然后,将此颗粒同腺病毒载体于室温孵育30分钟。扫描电镜结果表明携带了EGFP基因的腺病毒载体同微球颗粒形成了PHBHHx-腺病毒复合物。将此复合物通过腹腔干灌注到Balb/c小鼠胰腺组织。5天后,免疫组化染色结果发现大约有40%的毛细血管被标记,胰岛细胞有一小部分被标记,而腺泡和胰管没有被标记。相反,在其它组织,如肝脏和脾脏,被病毒感染的血管内皮细胞比例很低。与其报道的优越的组织相容性相一致,所有被检测的器官中都未发现PHBHHx颗粒。最后,脾脏B细胞激活检测结果显示,PHBHHx-腺病毒复合物可减轻由单纯腺病毒载体所引起的免疫反应。实验结果表明,利用PHBHHx-腺病毒复合物,我们成功建立了一个有效标记胰腺毛细血管的方法,该方法有可能为糖尿病及心脑血管疾病的基因治疗提供一条有用的途径。
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