论文部分内容阅读
犬小孢子菌又称羊毛小孢子菌，是在世界范围流行的浅部致病真菌，总体发病率呈逐年上升趋势，是一种常见的发内发外型亲动物性皮肤癣菌，在猫狗身上长期存在而不致病，经密切接触后可传染给人，尤其是儿童，由于皮脂腺不发达，抑菌能力低，具有较高的易感性。犬小孢子菌主要引起头癣、体癣、股癣、足癣，偶可致甲癣，在一定条件下，可致头皮深在感染导致脓癣，随着家庭宠物饲养的流行，成为儿童头皮脓癣的主要致病菌之一。目前对犬小孢子菌发病机制的研究主要集中在其分泌的角蛋白酶类型，活力及毒力的研究。对身体不同部位来源的同种菌株不同温度下的形态学改变及其基因分型知之甚少。本文以犬小孢子菌为研究对象，从生物学角度探讨犬小孢子菌脓癣株、头癣株、体癣株在不同温度下的形态变化及同种不同菌株基因型方面的差异，及其与发病机制的关系，为临床诊断、治疗，进一步深入研究犬小孢子菌提供依据。目的观察不同温度下来自身体不同部位的犬小孢子菌各菌株的形态学区别，及基因型的差异，为进一步深入研究其发病机制提供依据。方法1.菌培养活化本科室保存的犬小孢子菌脓癣株、头癣株、体癣株，分别转种于25℃37℃平皿培养、钢圈法小培养，观察菌落的生长形态及显微镜下形态。2.透射电镜将鉴定为犬小孢子菌的脓癣株、头癣株、体癣株，分别接种于米饭培养基，25℃，温箱培养，7天后取菌落电镜下观察形态。3. RAPD利用随机合成的寡聚核苷酸作引物，以犬小孢子菌的脓癣株、头癣株、体癣株的基因组DNA为模板进行PCR扩增。结果1．菌落形态：25℃犬小孢子菌头癣株生长优于体癣株，体癣株优于脓癣株；37℃脓癣株生长最快，头癣株优于体癣株。25℃时脓癣株、头癣株、体癣株均可见明显的黄色色素，37℃时均未见色素(见图1、2、3、4)。2．显微镜下形态：在两种不同的温度下，犬小孢子菌脓癣株、头癣株、体癣株均可见菌丝和大分生孢子；三者的主要区别在于25℃时头癣株、体癣株相对于脓癣株菌丝量多，交织，分隔，大分生孢子饱满；37℃时脓癣株比头癣株菌丝量多，交织，分隔，大分生孢子饱满；体癣株次之（见图5）。3.电镜下形态：犬小孢子菌脓癣株孢子饱满，细胞壁厚，细胞器明显可见，含丰富的线粒体；头癣株孢子呈梭状，细胞壁稍薄，细胞器可见，有线粒体；体癣株孢子呈梭状，细胞壁薄，细胞器、线粒体模糊（见图6）。4. RAPD：犬小孢子菌脓癣株、头癣株、体癣株见共有扩增带型，不同地区来自身体不同部位犬小孢子菌见不同的条带和带型（见图7）。结论1.犬小孢子菌脓癣株、头癣株、体癣株分别在25℃、37℃生长时在生物学形态方面有差异。2.在37℃的条件下，犬小孢子菌头癣株较体癣株耐热，体癣株较脓癣株耐热。3.犬小孢子菌脓癣株、头癣株、体癣株在电镜下的超微结构有区别，脓癣株与头癣株、体癣株相比较孢子饱满，细胞壁厚，细胞器明显可见，含丰富的线粒体。4. RAPD能够用于犬小孢子菌的DNA分型，同种不同株的犬小孢子菌电泳后指纹图谱有差异。