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目的：
1．探讨不同浓度的FSH对人卵母细胞体外培养的成熟率以及卵母细胞非整倍体发生的影响；
2．分析FSH浓度对卵母细胞纺锤体形态结构的影响；
3．建立对卵母细胞极体进行非整倍体筛选的方法。
材料与方法：
收集2008年10月～2009年5月中山大学附属第一医院生殖中心在进行卵胞浆内单精子注射（intracytoplasmic sperm injection，ICSI）时的不成熟卵母细胞。将不成熟的GV和MI期卵母细胞按日期随机分到4组含不同浓度FSH（0，5．5ng/ml，22ng．/ml，2000ng/ml）的卵母细胞体外成熟（in vitro maturation，IVM）培养液中。4～6h观察一次卵母细胞成熟情况。在卵母细胞成熟后立即使用Polscope纺锤体成像系统（MTG，德国）观察卵母细胞的纺锤体后并活检第一极体。活检后极体与卵细胞分别固定在载玻片上，采用不同荧光标记的五色荧光原位杂交（fluorescent in situ hybridization，FISH）探针检测13、16、18、21和22号染色体。应用免疫荧光染色方法分析观察FSH对体外培养卵母细胞纺锤体及染色体形态的影响。
结果：
共收集来自69例病人的204个不成熟卵子，其中GV期卵子140个，MI期卵子64个。体外培养成熟后共获得136个成熟卵母细胞，其中由GV卵子培养成熟84个，成熟率60．0％；由MI期卵子培养成熟52个，成熟率81．5％。4组间GV、MI成熟率的比较均无统计学差异。
对136个成熟卵母细胞进行第一极体活检，其中成功活检131个，成功固定129个第一极体；成功固定了126个活检后的卵母细胞，固定成功率为96．1％。对成功固定的129个极体及126个卵母细胞行荧光原位杂交分析，分别获得120个可分析的极体FISH结果及120个可分析的卵母细胞FISH结果。极体和卵母细胞FISH诊断符合率为87．5％。
4组体外培养卵母细胞的非整倍体发生率分别26．7％，23．3％，36．7％及63．3％。高浓度FSH培养组（2000ng/ml）非整倍体发生率显著高于其他各组（P＝0．002）。在应用免疫荧光观察卵母细胞纺锤体的形态中，高浓度（2000ng/ml）与常规IVM的FSH培养浓度（5．5ng/ml）相比，卵母细胞纺锤体形态及染色体分布没有明显差异。
结论：
高浓度FSH增加体外培养卵母细胞第一次减数分裂错误，从而导致卵母细胞非整倍体发生率增加。运用极体活检和FISH可有效地进行卵母细胞非整倍体的筛选。