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[目 的]通过检测退变性脊柱侧凸患者外周静脉血及组织标本中的细胞免疫及体液免疫相关指标,与正常人血液及创伤患者相对正常组织标本的相关指标进行对比分析,明确退变性脊柱侧凸患者的免疫学功能状态,探讨其与该病发生发展间可能存在的相关关系及潜在机制,为退变性脊柱侧凸的病因研究提供理论依据,同时为退变性脊柱侧凸的诊疗提供新的理论基础。[方 法]1.经过昆明医科大学第二附属医院医学伦理委员会审批,签署知情同意书后,排除患有免疫相关疾病及感染相关疾病的研究对象,收集2019年11月～2020年2月间在昆明医科大学第二附属医院收治的8例退变性脊柱侧凸患者、8例同期因脊柱创伤行手术治疗患者、以及在此期间招募的8名正常人志愿者的临床资料和组织或/及血液标本。2.分组:退变性脊柱侧凸患者8人作为观察组,年龄49～63岁(平均年龄56.5±4.50岁),患者cobb’s角范围在12～16°(平均为13.38±1.51°)。同期招募的8名正常人作为正常血标本对照组,年龄在26～51岁,平均年龄为36.25±10.79岁。因脊柱创伤行手术治疗的患者8人作为组织标本对照组,年龄在38～60岁,平均年龄为47.0±7.60岁。(3)样本获取:观察组患者术前抽取外周静脉血,术中获取手术摘除的包括髓核、纤维环及软骨终板在内的椎间盘组织,黄韧带组织及椎旁肌肉组织;正常人抽取外周静脉血;组织标本对照组获取术中切除的正常椎间盘及黄韧带组织及椎旁肌肉组织。(4)标本的处理:血标本采用流式细胞仪测定CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞亚群比例,CD4+T/CD8+T细胞的比值;使用免疫比浊法测定血清中IgM、IgG、IgA、补体C3、C4水平,用电化学发光法测定血清白细胞介素6(IL-6)水平。获取的组织标本,采用4%多聚甲醛常温固定,再制成石蜡切片,常规HE染色,在镜下观察两组椎间盘组织、黄韧带组织、椎旁肌肉组织在病理学改变;同时,采用免疫组化染色方法对切片进行染色,观察不同部位标本CD4阳性、CD8阳性T淋巴细胞的分布以及细胞因子IL-6的表达,采用图像分析和数字病理系统及ImageJ方法对免疫组化的结果进行分析。所有数据采用SPSS26.0软件进行统计学分析。[结 果]1.观察组血液样本中,CD8+T淋巴细胞亚群比例为34.06±8.45%,高于正常血标本对照组(20.39±2.34%),观察组CD4+/CD8+T细胞比值(1.22±0.57),低于正常血标本对照组(2.46±0.75),两组比较差异有显著性(P<0.05);观察组血标本的CD3+T淋巴细胞亚群比例(76.44±7.09%)、CD4+T淋巴细胞亚群比例(37.77±12.20%),与正常血标本对照组的CD3+T(75.03±0.75%)、CD4+T淋巴细胞亚群比例(48.78±9.03%)相比,差异无统计学意义(P>0.05);观察组的8个血液样本中,血清IgG含量为7.81±2.50g/L,低于正常血标本对照组(14.41±1.77 g/L)、IgM含量为1.06±0.26 g/L,低于正常血标本对照组(1.88±0.63 g/L)、补体C3含量为0.77±0.15 g/L,低于正常血标本对照组(0.86±0.07 g/L),两组比较差异均具有统计学意义(P<0.05);观察组血清 IgA(1.54±0.77g/L)、补体 C4(0.17±0.04g/L),与正常血标本对照组的IgA(2.03±0.56 g/L)、补体C4(0.18±0.04g/L)相比,差异无统计学意义(P>0.05);2、免疫组化染色结果提示,在观察组的椎间盘、黄韧带、椎旁肌组织中,可见CD4、CD8阳性淋巴细胞的分布,椎间盘中主要分布在纤维环边缘区域,黄韧带中主要分布在骨化的多细胞类型聚集区和新生血管周围,椎旁肌肉中主要分布在血管周围;而在组织标本对照组中,未见明显的CD4、CD8阳性淋巴细胞分布。在ImageJ处理扫描图像进行半定量的观测中,观察组三种组织中的CD4、CD8阳性细胞率和免疫组化AOD值均高于组织标本对照组(P<0.05)。3、观察组血液样本中,血清IL-6含量为5.74±3.23g/L,显著高于正常血标本对照组(1.01 ±0.45g/L),两组比较差异具有统计学意义(p<0.05);两组的椎间盘、黄韧带、椎旁肌肉组织标本切片中均有IL-6的表达,但与组织标本对照组相比,观察组3种组织的IL-6阳性表现更为明显。经过图像分析和数字病理系统、ImageJ软件分析处理后,统计学结果显示,在这三种组织中,观察组IL-6阳性细胞率和免疫组化AOD值均高于组织标本对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。[结 论]1.退变性脊柱侧凸患者的全身免疫系统功能与正常人存在差异,细胞免疫及体液免疫与正常人相比均存在差异,细胞免疫功能处于激活后的相对“抑制状态”,而体液免疫功能减退。2.退变性脊柱侧凸患者局部病变部位组织中观察到在正常人无表达的CD4、CD8的阳性表达的T淋巴细胞,表明局部免疫活动功能增强;3.IL-6参与了退变性脊柱侧凸的病理过程,并在退变部位的椎间盘、黄韧带和椎旁肌肉中发挥作用。