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目的本课题以中药多成分药动-多指标药效PK-PD模型的理论探索和实践检验为目标,以大黄游离蒽醌为实验对象,以急性胰腺炎诱导的肠屏障损伤为试验模型,以芦荟大黄素、大黄酸、大黄素和大黄酚为PK指标,以肿瘤坏死因子α、内毒素和二胺氧化酶为PD指标,以大黄作用机制为指向,建立基于部分作用机制的PK-PD模型。方法采用高效液相色谱法同时测定血清中五种大黄游离蒽醌的浓度,以正常动物为实验对象,建立药物吸收动力学模型,应用统计矩法计算相关药动学参数。采用逆行胰管注入5%牛磺胆酸钠建立重症急性胰腺炎诱导的犬肠屏障损伤动物模型,首先对该动物模型进行了动态评价,在此基础上观察药物对该模型的作用,以终点显色法测定血液中内毒素含量、比色法测定血液二胺氧化酶活性、ELISA法测定血液中肿瘤坏死因子-α含量,获得评价肠屏障功能损伤的药效学指标,同时测定其血药浓度数据,建立和药动学时量曲线相应的时效曲线。采用结构方程分析PD部分,建立非直接响应PD模型:以最大效应模型、线性模型和零级模型连接多成分PK数据和PD模型。结果(1)大黄蒽醌在犬的吸收动力学研究结果发现：芦荟大黄素、大黄酸、大黄素与大黄酚四种游离蒽在门静脉血液中能被检测到,并获得了其相关药动学参数,而大黄素甲醚仅在少数动物个别时间点能检测到,未获得其药动学参数。在体循环血液中,多数时间点能检测到大黄酸,但血药浓度较低,仅少数时间点检测到痕量芦荟大黄素、大黄素与大黄酚,无法检测到大黄素甲醚,相比门静脉血药浓度明显降低。大黄蒽醌在SAP犬与正常犬的吸收动力学参数无明显差异。(2)肠屏障损伤动物模型动态评价研究发现,SAP早期,主要表现为肠道组织炎症反应和粘膜细胞损伤；造模后6-12h内血液中内毒素含量低于正常水平。大黄蒽醌可降低SAP犬血液中TNF-α、DAO水平,升高内毒素水平。(3)优化后的稳健模型认为大黄酸和大黄素为保护大黄肠屏障的主要成分,大黄酸零级增加LPS浓度、降低DAO浓度,大黄素非直接抑制TNF-a浓度。结论(1)重症急性胰腺炎对大黄游离蒽醌的吸收动力学参数无明显影响,肠道与肝脏可能对大黄游离蒽醌存在明显的代谢或转化作用。(2)SAP早期肠屏障损伤最为主要的病情变化之一为组织血流供应显著下降,大黄游离蒽醌改善肠道微循环功能是其保护肠屏障的重要机制之一。同时,该作用还与减少机体炎症反应和肠粘膜上皮细胞损伤有关。(3)结合PD指标生化来源,大黄在SAP性肠损伤治疗过程中,其主要化学成分大黄酸可能主要是发挥改善微循环的作用。大黄素则可能是通过抑制细胞核中蛋白合成的相关过程,从而间接降低了血清中的TNF-α含量,而达到减少SAP继发的肠道炎症反应。(4)以作用机制为导向,以结构方程和微分动力系统为方法,可构建出适用于中药多成分多作用的PK-PD模型,本研究对中药多成分多效应之间的关系研究具有一定的借鉴意义。