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先兆子痫是产科重大疾病之一，主要症状为孕妇妊娠20周以后突然出现高血压、蛋白尿及多脏器功能紊乱。其发病率在全球范围约为3-5％，在围产保健不完善的国家和地区可高达10-15％。这一疾病在世界范围内都是产科临床上导致孕产妇死亡的主要原因。由于先兆子痫患者在发病前不表现出典型的临床症状，一旦急性发病即带来较严重的危害，因而对其特异性标志分子的鉴定以实现有效的早期预测和诊断，是该领域研究的重点所在。先兆子痫发病机制尚未阐明，但学者普遍认同胎盘早期发育障碍是其重要原因。胎盘作为妊娠过程中最大的内分泌器官，能够向母体循环释放多种分子，胎盘发育异常会导致这些分子的表达和分泌紊乱，使母体血中的蛋白种类和含量改变。这提示在母血中筛选和鉴定先兆子痫特异性标志蛋白是实现先兆子痫早期诊疗的有效途径，同时也是探寻先兆子痫发生机制的重要切入点。 本研究于2005年11月至2007年12月间追踪了在北京大学第一医院妇儿医院进行产前保健的孕妇，纳入40例重度先兆子痫患者和40例正常妊娠妇女作为研究对象。通过前瞻性巢式病例.对照法获取重度先兆子痫患者和正常妊娠妇女在妊娠不同阶段的血浆。选取6对妊娠15-18周龄血浆进行高分辨率二维电泳比较蛋白组学分析，结合生物信息学分析、MALDI-TOF质谱鉴定和Westernblotting，筛选到6个先兆子痫血浆差异蛋白，分别为α2抗纤溶酶(SerpinF2)、维生素D结合蛋白(VDBP)、胰岛素样生长因子酸易变亚基(IGFALS)、性激素结合蛋白(SHBG)、妊娠特异性β1糖蛋白(PSG1)和玻连蛋白(VTN)。生物学通路分析表明这些蛋白参与血管发生、伤口愈合、细胞侵润、急性期免疫反应等生物学过程。 进而用ELISA方法分析了先兆子痫患者和正常孕妇妊娠不同阶段血浆中Plasmin-SerpinF2复合物(PAP)的水平。结果显示正常妊娠过程中，血浆PAP水平随妊娠周龄增加而逐渐升高，至分娩前达到峰值；重度先兆子痫患者血浆PAP水平随妊娠周龄的变化模式与正常妊娠组相似，但在各个妊娠阶段其浓度远远高于相应的正常对照。ROC曲线分析表明血浆PAP水平在妊娠各个阶段对先兆子痫风险都有较好的预测价值，尤其在妊娠早期(6-14周和15-18周)预测价值最高，其截断值分别为0.1175μg/ml和1.0350μg/ml。 鉴于SerpinF2在先兆子痫妊娠早期的显著变化，我们进一步研究了SerpinF2在胎盘中的功能。采用原位杂交、实时定量PCR和Westernblotting等手段确切地证实胎盘滋养层细胞能够产生SerpinF2；重度先兆子痫胎盘中的促凝血分子SerpinF2、Prothrombin、Thrombin、Fibrinogen等显著高表达，胎盘中过度沉积的Fibrin与SerpinF2共定位；体外实验显示SerpinF2阻碍滋养层细胞在Fibrin基质上的迁移。 为了进一步研究SerpinF2在先兆子痫患者血浆和胎盘中异常升高的原因，我们分析了SerpinF2的启动子区域结构，发现该区域富含GC-box、TATA-box、增强子等转录调控元件，并且有两个SNP位点，分别是-203位的rs11549259和+60位的rs4989024。对这两个位点基因分型后发现，先兆子痫母体DNA中rs4989024罕见等位基因G的频率显著高于正常妊娠组；而胎儿DNA中先兆子痫组rs4989024等位基因G的频率则远低于正常妊娠组。转录因子结合位点预测结果显示rs4989024多态性可能影响胎盘选择性表达的转录因子GCM1与启动子区域序列的结合，从而造成SerpinF2在胎盘局部高表达。 综上所述，本研究鉴定了一组先兆子痫早期预测的候选标志蛋白，其中SerpinF2在妊娠早中期具有较高的预测价值；SerpinF2等促凝血因子在胎盘中的异常高表达造成胎盘局部凝血-纤溶平衡破坏，可能是导致胎盘局部血流灌注不足和滋养层细胞迁移能力降低的重要原因；SerpinF2启动子区域rs4989024位点多态性与先兆子痫密切相关。这些研究结果为探寻胎盘早期发育障碍导致先兆子痫的发生奠定了重要基础。