【摘 要】
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本研究采用体外细胞培养方法,利用分子生物学技术系统研究了缺氧诱导肿瘤细胞增殖及诱导血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响;γ-生育三烯酚抑制肿瘤作用及其机制;并进一步研究了
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本研究采用体外细胞培养方法,利用分子生物学技术系统研究了缺氧诱导肿瘤细胞增殖及诱导血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响;γ-生育三烯酚抑制肿瘤作用及其机制;并进一步研究了γ-生育三烯酚对缺氧诱导VEGF表达的机制。
1、利用浓度为50、100、150、200、250μmol/L缺氧诱导剂Cobalt(Ⅱ)Chloride诱导肿瘤细胞缺氧,证实了缺氧诱导人胃腺癌SGC-7901细胞增殖,并调节Bcl-2家族蛋白表达,抑制肿瘤细胞凋亡,以150μmol/L作用最强;
2、缺氧激活ERK-MAPK信号转导途径,诱导缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和VEGF表达增强,利用MEK1阻断剂U<,0126>阻断信号转导,可见HIF-1α和VEGF表达降低,证实ERK-MAPK信号转导参与了缺氧诱导SGC-7901细胞VEGF表达调节,阻断该信号转导途径,可以抑制VEGF表达;
3、浓度为15、30、60μmool/L的γ-生育三烯酚可引起SGC-7901细胞DNA损伤,存在剂量依赖性关系;通过调节细胞周期蛋白表达,使细胞周期停滞发生在G1期;研究发现γ-生育三烯酚通过参与调节细胞外依赖死亡受体介导的和细胞内线粒体凋亡途径,激活Caspase-3,促使PARP降解,诱导细胞凋亡;
4、阐明了γ-生育三烯酚抑制肿瘤的作用及与核因子-κB和环氧合酶-2蛋白表达的关系;
5、首次研究γ-生育三烯酚影响MAPK信号转导途径,发现通过抑制Raf-1的表达,抑制蛋白激酶级联反应,影响c-Myc和VEGF表达;
6、首次研究了γ-生育三烯酚对缺氧诱导肿瘤细胞VEGF表达的影响,研究证实60μmol/L的γ-生育三烯酚可以抑制ERK-MAPK信号转导,拈抗由缺氧诱导的VEGF表达。
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