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目的本研究拟运用蛋白组学Western Blot技术对前期iTRAQ技术筛选出的慢性乙型肝炎(CHB)肝郁脾虚证显著性差异表达蛋白进行药物干预的验证,观察中西医治疗组、西医治疗组、健康对照组差异蛋白的表达变化情况。以期获得慢性乙型肝炎肝郁脾虚证基于药物干预的特征性表达蛋白,探索药物疗效与证候特征性蛋白表达变化之间的规律。为慢性乙型肝炎肝郁脾虚证证候生物学基础、疗效评价及药物作用靶点的蛋白质分子标志物的研究提供实验依据。方法将纳入的12例慢性乙型肝炎肝郁脾虚证患者随机分成中西医治疗组、西医治疗组各6例,纳入健康对照组6例进行对照。分别采集治疗前、治疗后1个月、治疗后3个月外周血样本,分离血清、提取蛋白质,运用Western Blot技术检测前期筛选出的四种显著性差异蛋白(PSMA6、PF4V、PSMA7、GRP78)在各组间的表达变化情况,运用imageJ、GraphPad Prism 5软件进行分析。采用IBM SPSS Statistics V20.0软件对各组的性别、年龄及实验室指标进行统计学分析。结果1、慢性乙型肝炎肝郁脾虚证中西医治疗组、西医治疗组治疗前与健康对照组比较PSMA6、GRP78、PF4V、PSMA7蛋白表达均上调,差异有统计学意义(P<0.05)。2、慢性乙型肝炎肝郁脾虚证中西医治疗组治疗前与治疗后比较PSMA6、GRP78蛋白表达明显下调,差异有统计学意义(P<0.05);而PF4V、PSMA7蛋白表达变化规律差异无统计学意义。3、慢性乙型肝炎肝郁脾虚证西医治疗组治疗前与治疗后比较PSMA6、PF4V、PSMA7、GRP78蛋白表达变化规律差异无统计学意义。4、慢性乙型肝炎肝郁脾虚证中西医治疗组治疗3个月后与治疗前比较ALT、TBIL、HBV-DNA均低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05),AST差异无统计学意义;西医治疗组治疗3个月后与治疗前比较ALT、HBV-DNA均低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05),AST、TBIL差异均无统计学意义;中西医治疗组与西医治疗组治疗3个月后比较,中西医治疗组HBV-DNA低于西医治疗组,差异有统计学意义(P<0.05),ALT差异无统计学意义。结论本研究得出慢性乙型肝炎肝郁脾虚证差异表达蛋白PSMA6治疗前与健康对照组比较表达趋势上调,与课题组前期筛选结果一致。PSMA6蛋白表达变化水平在中西医治疗组呈明显的下调趋势,推测其作为慢性乙型肝炎肝郁脾虚证潜在的疗效评价标志物较为可靠。本研究对慢性乙型肝炎肝郁脾虚证中医辨证客观化、证候疗效评价及药物作用靶点的研究有重要意义。