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γ氨基丁酸（GABA）是一种抑制性神经递质,广泛分布于中枢神经系统和外周神经系统,与多种疾病如疼痛、抑郁、癌症、药物成瘾等密切相关。GABABR由两个亚基GABAB1和GABAB2组成,异源二聚化后形成功能GABABR。位于突触前的GABABR被激活后,通过偶联Gi/o-型蛋白而抑制N型（Cav2.2）或P/Q型（Cav2.1）钙离子通道,减少钙内流,抑制兴奋性递质的释放,从而发挥生理功能。现已上市的GABABR激动剂巴氯芬在临床上可以治疗痉挛、降低酒精成瘾、缓解疼痛等,但副作用明显。α-芋螺毒素Vc1.1、PeIA等可作用于GABABR介导的Cav2.2及烟碱型乙酰胆碱受体（nAChR）,并具有显著的镇痛活性。前期,本实验室合成了Vc1.1及其一系列突变体,利用经典镇痛模型大鼠坐骨神经半切模型（PSL）测定了其镇痛活性,发现有几个突变体活性比Vc1.1高,但对烟碱型乙酰胆碱受体活性低,确切作用靶点未知。本课题组发现了一系列芋螺多肽,是否作用于GABAB受体介导的Cav2.2需要探索。另,解热镇痛药物结构迥异,但文献中报道的作用机制为抑制环氧化物酶（COX）,使前列腺素（PG）生成减少,我们怀疑一些药物具有其他作用靶点,如作用于上述GABABR介导的Cav2.2。因此本课题测定上述芋螺毒素及解热镇痛药物对GABABR介导的Cav2.2的抑制活性,以期发现新的GABABR介导的Cav2.2抑制剂。此外,本实验室前期发现Bt22.1作用于?9?10烟碱型乙酰胆碱受体（nAChR）,为测定其结构活性关系,合成了系列Bt22.1突变体。主要研究结果如下:（1）合成了21个芋螺毒素及突变体,如Vc1.1、Vc1.1[N9R]、Benzoyl-Vc1.1[N9R]、Bt22.1、Bt22.1[D1A]等。（2）建立了GABABR介导的Cav2.2药物筛选的电生理平台。（3）测定了Vc1.1[N9R]、Benzoyl-Vc1.1[N9R]对GABABR介导的Cav2.2活性,发现benzoyl-Vc1.1[N9R]对GABABR介导的Cav2.2抑制活性很高,IC50仅0.2（0.10.3）nM,比Vc1.1 IC50（2.4（0.87.0）nM）低十倍,而Vc1.1[N9R]IC50（4.9（2.69.1）nM）与Vc1.1活性相当。但Vc1.1、Vc1.1[N9R]、Benzoyl-Vc1.1[N9R]对单独的Cav2.2均无活性。（4）测定了Lt1.3-I、Lt1.3-II对GABAB介导的Cav2.2抑制活性,结果表明二硫键配对方式为“1-4,2-3”的Lt1.3-II IC50为33.9（10.7107.1）nM,而二硫键配对方式为“1-3,2-4”Lt1.3-I对该受体无活性。（5）测定了阿司匹林、布洛芬、吲哚美辛等八个解热镇痛药物对GABABR介导的Cav2.2活性,发现阿司匹林及双氯芬酸钠具有较强活性,IC50分别为0.21μM（0.130.34）μM及0.15μM（0.060.37）μM,其他药物活性较低。总之,本课题发现Benzoyl-Vc1.1[N9R]专一性作用于GABABR介导的Cav2.2,活性较Vc1.1高10倍,首次发现含二硫键“C1-C4,C2-C3”型α-芋螺多肽作用于GABABR介导的Cav2.2,并发现数个已上市解热镇痛药物也作用于GABABR介导的Cav2.2。本课题的研究扩大了芋螺多肽及解热镇痛药物的作用靶标,为新型镇痛药物的发现开辟了新线索。